[发明专利]一种多肽——人脂肪分泌蛋白－27.06和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人脂肪分泌蛋白-27.06，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

脂肪组织在机体的能量储存、脂肪酸代谢以及葡萄糖的动态平衡等方面起着极其重要的作用(Cornelius，P.，MacDougald，O.A.，andLane，M.D.(1994)Annu.Rev.Nutr.14，99-129)。脂肪组织能够在营养充足的时期使脂肪细胞合成以及储存甘油三酸酯并调节液体以使机体禁食(Spiegelman，B.M.，and Hotamisligil，G.S.，(1993)Cell 73，625-627)，还能够调节血糖水平。近来的研究表明，由于分泌分子的存在，脂肪组织在能量平衡系统中具有更高的活性，从脂肪组织分泌出的分子对于脂肪以及其他组织具有不同的调节功能，它体现了脂肪组织生理学新的一面。

用mRNA的差异表达克隆一个新的脂肪基因命名为adipoQ。序列分析表明adipoQ是一个与补充因子C1q的亚基、胶原蛋白α1等有显著同源性的分泌蛋白，它编码了一个含有247个氨基酸的多肽序列，它在氨基末端含有一个分泌信号序列，一个胶状的结构，在羧基末端有一个球状成分。这个新基因在脂肪组织的不同时期具有高度的调节作用，它主要是在体内的脂肪组织进行表达。在老鼠以及兔子的脂肪组织中adipQ的表达具有很高的特性。另外在肥胖小鼠以及人的脂肪组织中，adipQ mRNA的表达量明显的减少。

在研究中得知adipQ分子的许多特性都表明它具有脂肪细胞性号分子的功能：首先，adipQ包含一个狂犬病的信号多肽序列并且它与几个分泌蛋白具有同源性，如C1qA、B，胶原蛋白α1等。adipQ作为一个表达载体转染将会从纤维原细胞中分泌出来。其次，adipQ的表达在分化过程中具有很高的调节作用，并且在体内被脂肪组织严格的限制着。最后，啮齿动物以及人类的肥胖影响adipQ的表达，这一点表明adipQ在这种病理状态的一种调节异常。以上这些特性于从脂肪组织分泌出的一些其他的重要信号蛋白如TNF-α、肥胖基因产物的特性非常相似。

本发明的人的基因与老鼠编码的脂肪分泌蛋白的基因在蛋白水平上有32％的同一性和46％的相似性。故认为本发明的新基因为一种新的人的脂肪分泌蛋白基因，命名为{人脂肪分泌蛋白-27.06}，并以此推断其与老鼠的脂肪分泌蛋白相似，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人脂肪分泌蛋白-27.06蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人脂肪分泌蛋白-27.06蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人脂肪分泌蛋白-27.06蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人脂肪分泌蛋白-27.06以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人脂肪分泌蛋白-27.06的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人脂肪分泌蛋白-27.06的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人脂肪分泌蛋白-27.06的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人脂肪分泌蛋白-27.06的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人脂肪分泌蛋白-27.06的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人脂肪分泌蛋白-27.06异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中37-777位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1701位的序列。