[发明专利]一种多肽——人钠离子与氢离子交换蛋白－60.72和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

电平衡的单价的阳离子和氢离子的反向转移蛋白和交换蛋白是有关线粒体容量的重要成分。功能研究表明，在哺乳动物的线粒体中，有两种单价的阳离子和氢离子的交换蛋白形式。一种是调节基质钠离子和呼吸产生的氢离子的交换(Garlid，k.D.，1991，J.Biol.Chem.266，6518-6523)。另一种单价的阳离子和氢离子的交换蛋白是潜伏的，以相似的效率运输所有的碱金属。除了在线粒体中的作用外，哺乳动物的NHEs还参与其它一些的必要的细胞内过程，其中包括细胞内PH的控制，细胞体积的保持，通过肾，肠和其它上皮的钠离子的再吸收，生长因子诱导的某种细胞形式的增生(Grinstein，S.，1989，Biochim.biophys.Acta988，73-97)。

通过二级结构分析，NHEs蛋白有膜拓扑结构——紧跟C末端的亲水区域的N末端的12α-螺旋跨膜片段。在跨膜片段9，和10之间的细胞外噜卟的N末端含有一个N-连接的糖基化位点(Asn³⁶⁹-Leu-Ser)，它在真核生物的NHEs结构中是高度保守的。

NHE1蛋白在体内广泛表达，大小约为5.0Kb。在网状细胞中发现有NHE1的特征mRNA存在，这证明网状细胞可表达NHE1。NHE1蛋白在分化的末期表达，并且红细胞中的钠离子与氢离子交换蛋白的活性与NHE1密切相关。这表明，NHE1在人网状细胞中具有主导功能。(Rangaprasad Sarangarajan，et.al，Biochim.biophys.Acta，1374：56-62，1998)

本发明的人的基因与钠离子与氢离子交换蛋白基因NHE1在蛋白水平上有61％的同一性和77％的相似性。且两者均含有氢离子交换蛋白家族的特征性结构域。基于以上各点，故认为本发明的新基因为钠离子与氢离子交换蛋白基因，命名为{人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72}。并以此推断其与钠离子与氢离子交换蛋白NHE1相似，同为钠离子与氢离子交换蛋白家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人钠离子与氢离子交换蛋白-60.72异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中33-1691位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1782位的序列。