[发明专利]一种多肽——人丝/苏氨酸蛋白激酶－36.08和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种多肽——人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-36.08，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

多细胞有机体的进化依赖于细胞之间的互相通讯联系。由于细胞间存在着精细的分工，一些细胞群体有赖于其他细胞群体，并要求其他的细胞群体产生应答反应。这种精巧的细胞间通讯网络可以控制细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种生命过程。

细胞间以3种方式进行通讯：(1)细胞通过分泌化学信号进行相互通讯；(2)细胞直接接触，通过与质膜结合的信号分子影响其他细胞；(3)细胞间形成缝隙连接使细胞质相互沟通，通过交换小分子来调节代谢反应。

信号传导是将细胞外信号转换为细胞内信使的过程。亲水性信号分子包括神经递质、生长因子、细胞因子、局部化学递质和大多数激素，它们不能穿过质膜，只能与细胞表面的受体结合形成配体受体复合物进行信号转导。根据信号转导的机制和受体蛋白的类型，细胞表面受体可分为3种：(1)离子通道耦联的受体；(2)连接酶的表面受体；(3)与G蛋白耦联的受体。

蛋白质磷酸化是真核生物细胞调控中一个基本调控机制，同时也是最普通的蛋白质修饰方式。例如，细胞分裂，细胞新陈代谢，细胞粘连和细胞迁移，细胞间通讯以及信号传导等细胞活动都出现了蛋白质磷酸化。为了完成这些功能，人类编码基因中有2％-4％的基因编码大约2000种不同的激酶。(Hunter，1996)

丝/苏氨酸蛋白激酶是一类可以使其作用底物上的丝/苏氨酸残基磷酸化的蛋白激酶，在丝/苏氨酸蛋白激酶活化后向下游传递信号的过程中包括了很多丝/苏氨酸残基磷酸化级联反应，从而调控很多基因的表达。TAO是一种丝/苏氨酸蛋白激酶，因为它有1001个氨基酸，所以称为TAO。Northern杂交的结果显示，TAO在脑中高度表达。(J Biol Chem.1998 Oct 30；273(44)：28625-32)

研究发现，TAO存在两种形式：TAO1和TAO2，它们在结构上类似，都可以活化MAP激酶的激酶(MAPKK)，TAO被证明可以与MAPKK相互作用，MAPKK的结合功能域被证明存在于离TAO催化功能域C-端大约130个氨基酸残基处。体外实验的结果表明，TAO的MAPKK结合功能域可与MAPKK3和6作用，而不可与MAPKK1，2，4作用。(J Biol Chem 1999 Oct 1；274(40)：28803-7)

TAO可以使MAP激酶的激酶(MAPKK)的丝/苏氨酸残基磷酸化，从而活化了MAPKK。MAPKK磷酸化MAPK的苏氨酸和酪氨酸两个残基使之活化。这种双特异性的磷酸化就保证了MAPK不被其他蛋白激酶磷酸化，一直保持钝化状态，直至MAPKK活化后才能使MAPK活化，所以MAPKK唯一的底物就是MAPK。活化后的MAPK进入细胞核，通过磷酸化其他激酶或基因调节蛋白(转录因子)的丝/苏氨酸残基来活化它们，向下游传递信号，调节一些基因的转录表达，比如，jun和Elk-1或一些蛋白激酶和其他蛋白质。

虽然对TAO的结构和功能的具体研究还待进一步完成，但我们可以肯定的是TAO作为一种丝/苏氨酸蛋白激酶，在Ras和PKC等活化的丝/苏氨酸磷酸化的级联反应中有重要的作用，间接的，TAO对于信号传导过程有不可忽略的作用，它可以调控细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种生命过程。

本发明的人的该激酶与人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶在蛋白水平上有37％的相同性和56％的相似性。且两者均含有拓扑异构酶家族的特征性结构域。基于以上各点，故认为本发明的蛋白为人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，并以此推断其与人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶相似，同为人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-36.08蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-36.08蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-36.08蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-36.08以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。