[发明专利]一种多肽——5－磷酸D－核酮糖3－同分异构酶－25.08和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

本发明公开了一种新的多肽——5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08，编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于诊治多种疾病的方法，如心律失常、消化性溃疡、流产、代谢性白内障、胆汁性肝硬化等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其诊治作用。本发明还公开了编码这种新的5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08的多核苷酸的用途。

磷酸戊糖盐的氧化途经(OPPP)在原核以及真核细胞的糖类代谢中起到根本性的作用。在糖的氧化途经中，OPPP为脂肪酸和氨基酸的合成生产了还原剂。此路径的非氧化阶段产生了4-赤藓糖磷酸盐，用于合成芳香族的氨基酸，黄酮类似物，木质素，以及合成核苷酸的5-核糖磷酸盐。细胞胞质中的OPPP途经是氧化过程中谷胱甘肽还原酶的NADPH的至关重要的补充。动物和酵母细胞中的OPPP酶特有的存在于胞质中，在OPPP和戊糖磷酸盐循环中具有重要功能酶包括转羟乙醛酶，5-磷酸核糖异构酶和5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶(RPEase)。经过亲电子研究分析戊糖磷酸盐差向异构的去质子化和质子化作用，发现在5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶(RPEase)中存在Asp-43和Asp-185这两个不变的亚基，而在天冬氨酰基羧酸酯的接触反应中RPEase的His-41，His-74，His-98，Asp-72，和Glu-100又形成了两个氢联并起到去质子化和质子化作用，在接触反应中心的顶端有Met-45，Met-76，and Met-147等亚基。5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶(RPEase)催化卡尔文还原磷酸戊糖循环，我们发现这个酶在功能上也有氧化酶的作用。该酶存在于细胞质中，在动物的肝脏，骨髓，脂肪组织，红细胞，肾上腺皮质等组织中起到重要作用。

该5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶(RPEase)的作用异常将影响生物体的糖代谢，进而影响体内脂肪酸和氨基酸合成异常以及红细胞还原性，即引发一系列与之相关的糖类代谢紊乱性疾病，其表达异常还通常将导致生物体内血糖含量的异常，进而引发各种相关的代谢紊乱性疾病

本发明的人的该酶与5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶(RPEase)在蛋白水平上有的52％相同性和72％的相似性。且两者均含有5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶家族的特征性结构域。基于以上各点，故认为本发明的蛋白为5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶(RPEase)，命名为5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08。并以此推断其与5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶相似，同为5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶家族的成员，并具有相似的生物学功能。其突变或表达异常将导致相关代谢途径的异常，进而引发各种相关的疾病。

由于如上所述5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与5-磷酸D-核酮糖3-同分异构酶-25.08异常相关的疾病的方法。