[发明专利]一种多肽——腺苷三磷酸合成酶－10.89和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——腺苷三磷酸合成酶-10.89，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞活动的能量主要来自ATP。在动物细胞里，80％以上的ATP是在线粒体中合成的。线粒体通过呼吸链进行氧化磷酸化，将能量储存在ATP中。在线粒体的内膜上分布着进行氧化磷酸化的各种酶系，其中一类是ATP合成酶。

个寡聚跨膜部分，命名为CF(0)。它能作为一个质子通道或接触反应中心，与耦合因子CF(1)耦合。这个CF(0)c亚基(蛋白质9，蛋白脂质或亚基III)是一个8kd的高度疏水蛋白，它含有ATPase质子传导活性。结构上两个长末端疏水区域，和一个中心的亲水区域，这个疏水区域可能是跨膜的。N，N’-二环己基碳二亚胺(DCCD)能与亚基c共价相连从而丧失ATPase活性。DCCD能连接一个谷氨酸盐或一个天门冬氨酸盐位点，这个位点是位于蛋白C-末端附近的第二个疏水区域的中心。这个DCCD连接位点有一个特征性的区域：[GSTA]-R-[NQ]-P-x(10)-[LIVMFYW](2)-x(3)-[LIVMFYW]-x-[DE]本发明的多肽含有上述ATP合成酶的特征功能域，并且具有与ATP合成酶相似的生物学功能，因而被认为是一种新的ATP合成酶，在氨基酸代谢中发挥了重要的作用。若表达异常，产生能量与物质代谢的异常，会影响生物体的一系列代谢活动，引起生理功能紊乱，导致各种疾病的发生。

由于如上所述腺苷三磷酸合成酶-10.89蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的腺苷三磷酸合成酶-10.89蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新腺苷三磷酸合成酶-10.89蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——腺苷三磷酸合成酶-10.89以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码腺苷三磷酸合成酶-10.89的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码腺苷三磷酸合成酶-10.89的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产腺苷三磷酸合成酶-10.89的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——腺苷三磷酸合成酶-10.89的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——腺苷三磷酸合成酶-10.89的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与腺苷三磷酸合成酶-10.89异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1868-2167位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-3247位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制腺苷三磷酸合成酶-10.89蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与腺苷三磷酸合成酶-10.89蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。