[发明专利]一种多肽——子宫珠蛋白－10.02和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——子宫珠蛋白-10.02，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

子宫珠蛋白最早是从兔子子宫中得到，是一种含有70个氨基酸的球状蛋白，它能特异性地以高亲合力结合孕酮，同时也是磷酸脂酶A2的抑制剂。此外，人Clara细胞的磷脂结合蛋白(CCPBP)、家猫的主要变态反应原I的第一链(fel DI)、人乳腺珠蛋白、鼠前列腺类固醇结合蛋白等都与子宫珠蛋白有较为类似功能，它们的氨基酸序列中都含有一段较为保守的序列：[DEQ]-X(4)-[SN]-X(5)-[DEQ]-X-I-X(2)-S-[PSE]-[LS]-C。

通常子宫珠蛋白家族以二聚物的形式形成功能结构域，两条独立多肽链A、B通过两条二硫键(3SG(A)-69SG(B)和69SG(A)-3SG(B))反平行地连接。每条多肽链扭曲卷绕成4个α-螺旋结构。在各个α-螺旋之间及其尾部连接有小段线性蛋白或β-旋转蛋白结构。

子宫珠蛋白家族与其它球状蛋白一样，疏水性残基全部或部分埋藏在蛋白内部，亲水性残基暴露在表面。A、B两条多肽链通过二硫键相互结合，在空间上形成的一个疏水腔结构。当二硫键还原时，两条单体链的氨基端和羧基端形成一条通道，使结合物能够自由进出疏水腔，产生结合活性，两个二硫键在整个机制中起着封闭和开启通道的作用。

子宫珠蛋白家族通过独特的疏水性腔特异性结合孕酮、类固醇、磷脂等化合物，也是磷酸脂酶A2的抑制剂。子宫珠蛋白家族是一类较为重要的免疫调节蛋白，同时在一些癌症的形成过程中起着较为关键的作用。本发明的多肽含有子宫珠蛋家族上述的特征功能域，并且具有与子宫珠蛋家族成员相似的生物学功能，因而被认为是子宫珠蛋家族的新成员，在生殖系统中起着重要的调节作用，故子宫珠蛋白的表达异常引起结合孕酮、类固醇激素的异常，并引起相关的调节障碍。

由于如上所述子宫珠蛋白-10.02蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的子宫珠蛋白-10.02蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新子宫珠蛋白-10.02蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——子宫珠蛋白-10.02以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码子宫珠蛋白-10.02的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码子宫珠蛋白-10.02的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产子宫珠蛋白-10.02的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——子宫珠蛋白-10.02的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——子宫珠蛋白-10.02的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与子宫珠蛋白-10.02异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1072-1353位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2487位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制子宫珠蛋白-10.02蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。