[发明专利]一种多肽——光敏色素蛋白－9.35和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——光敏色素蛋白-9.35，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

植物光敏色素是一个由特异光感受器分子组成的家族，这些光感受器被植物用于监测环境中的光信号。这些光感受器与其它的光信号感受器一起，使植物得以根据光线的强弱、有无等变化随时调整自己的生长发育向着最有利于俘获光能的方向发展。植物光敏色素通过光感受器分子获得光信息，指导光感受器分子进行由光引导的、可逆的两种形式间的相互转换反应。这两种形式是：Pr(对于波长为665nm的红外光吸收最有效)以及Pfr(对于波长为730nm的远红外光吸收最有效)。光引发的Pfr能够启动一个转导过程，该转导过程能够使适合于外界环境条件的调节植物形态的基因表达达到最高状态。

每一个植物光敏色素分子都是由两个约125kDa的多聚肽组成的二聚物，每一个多聚肽又折叠成两个主要的结构域：一个NH₂-末端区域，含有一个共价连接的四吡咯载色体；一个COOH-末端区域，一个二聚反应的介质[Quail P.H.(1997)BioEssays19(7)：571-579]。NH₂-末端区域的载色体与一段高度保守的特征性序列片段上的半胱氨酸相连接。

已有研究发现集胞藻属菌株PCC6803具有一个类似于植物光敏色素蛋白的结构域，并且同样结合了一个载色体。

所有的光敏色素蛋白序列中均含有如下所示的高度保守的一致性序列片段：[RGS]-[GSA]-[PV]-H-x-C-H-x(2)-Y；其中的半胱氨酸残基即为载色体的连接位点。该位点的突变将导致光敏色素蛋白的活性的丧失，从而影响该蛋白在生物体内活性的发挥。

由于如上所述光敏色素蛋白-9.35蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的光敏色素蛋白-9.35蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新光敏色素蛋白-9.35蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——光敏色素蛋白-9.35以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码光敏色素蛋白-9.35的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码光敏色素蛋白-9.35的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产光敏色素蛋白-9.35的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——光敏色素蛋白-9.35的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——光敏色素蛋白-9.35的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与光敏色素蛋白-9.35异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中199-456位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1832位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制光敏色素蛋白-9.35蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与光敏色素蛋白-9.35蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。