[发明专利]一种多肽——谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55和编码这种多肽的多核苷酸无效

专利信息
申请号: 01105913.3 申请日: 2001-04-10
公开(公告)号: CN1380408A 公开(公告)日: 2002-11-20
发明(设计)人: 毛裕民;谢毅 申请(专利权)人: 上海博德基因开发有限公司
主分类号: C12N9/06 分类号: C12N9/06;C12N15/53;C12N15/63;C07K16/40;C12Q1/26;C12Q1/68;A61K38/44
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摘要:
搜索关键词: 一种 多肽 谷氨酸 亮氨酸 苯丙氨酸 缬氨酸 脱氢酶 11.55 编码 这种 多核苷酸
【说明书】:

发明属于生物技术领域,具体地说,本发明描述了一种新的多肽——谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55,以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenases GluDH)(EC 1.4.1.2,EC 1.4.1.3,andEC 1.4.1.4)是可以将谷氨酸盐中的NAD或者NADP依赖的可逆的去氨基催化成α-酮戊二酸盐。GluDH同工酶一般与氨的同化或者谷氨酸盐的异化有关。

亮氨酸脱氢酶(Leucine dehydrogenases LeuDH)(EC 1.4.1.9)是一种NAD依赖性酶,它可以将亮氨酸和一些其它的脂肪氨基酸的可逆去氨基催化转化成它们的酮类类似物。

苯丙氨酸脱氢酶(Phenylalanine dehydrogenase PheDH)(EC 1.4.1.20)也是一种NAD依赖性的酶,可以将L-苯丙氨酸的可逆脱酰胺基催化转化成苯基-丙酮酸盐。

缬氨酸脱氢酶(Valine dehydrogenase ValDH)(EC 1.4.1.8)是一种NADP-依赖性的酶,它可以将缬氨酸的可逆酰氨基催化转化成3-甲基-氧化丁酮酸盐。

这些酶在结构和功能上有非常相似,在富含氨基乙酸的地方都有保守的赖氨酸残基区域,这个保守区域可能就是这系列酶的特征序列。并且这个序列决定了这些酶的作用机制。序列片段:[LIV]-x(2)-G-G-[SAG]-K-x-[GV]-x(3)-[DNST]-[PL]其中K是活性位点,x可以一个任意氨基酸。而在谷氨酸脱氢酶的研究发现,无论是N.crassa,C.symbiosum,还是哺乳动物,它们都有这个保守序列。这一结构的高度保守性证明其对于这系列酶发挥正常的生理学功能有着重要的意义。对谷氨酸脱氢酶三维空间的研究发现,这个保守序列是谷氨酸的结合位点,并且在三维上,是类似于一个口袋形状的,中间含有活性位点。(Britton K.L et al.,Eur.J.Biochem.(1992)209:851-859)

本发明的多肽含有上述谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶的特征功能域,并且具有与谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶相似的生物学功能,因而被认为是一种亚硝酸/亚硫酸还原酶,在氨基酸代谢中发挥了重要的作用。若表达异常,则会影响则会影响生物体的一系列代谢活动,引起生理功能紊乱,导致各种疾病的发生。

由于如上所述谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55蛋白在机体内重要功能中起重要作用,而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白,因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55蛋白,特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础,因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与谷氨酸/亮氨酸/苯丙氨酸/缬氨酸脱氢酶-11.55异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽,该多肽是人源的,它包含:具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地,该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸,它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体:

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸;

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸;

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