[发明专利]一种多肽——带蛋白4.1家族－14.85和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——带蛋白4.1家族-14.85，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在位于细胞骨架和质膜之间的界面中，有许多细胞骨架相关蛋白，它们具有相似的特征，在N端具有大约是150个氨基酸的相似序列，这些蛋白称为带蛋白4.1家族，已经发现了有带蛋白4.1，埃兹蛋白，膜突蛋白，根蛋白，踝蛋白，丝足蛋白等。(ReesD.J.G.，et al.，Nature 1990 347：685-689；Funayama N.，Nagafuchi A.，et al.，JCell Biol.1991 115：1039-1048；Takeuchi K.，et al.，J.Cell Sci.1994107：1921-1928)。

带蛋白4.1家族中的每个成员都具有一些相同的结构特征，在N端是具有同源性，并且紧跟N端有一个富含α螺旋的区域，而在C端是一个富含电荷的区域。带蛋白4.1家族的N端的同源性，是因为这里有一个与血型糖蛋白结合的位点，而血型糖蛋白在细胞骨架中是一种主要的膜蛋白(Funayama N.，Nagafuchi A.，et al.，J CellBiol.1991 115：1039-1048)。研究发现，在所有的带蛋白4.1家族中的有两个高度保守的序列，一个是位于N端，而另一个是位于C端。

序列片段1：W-[LIV]-x(3)-[KRQ]-x-[LIVM]-x(2)-[QH]-x(0，2)-[LIVMF]-x(6，8)-[LIVMF]-x(3，5)-F-[FY]-x(2)-[DENS]

序列片段2：[HYW]-x(9)-[DENQSTV]-[SA]-x(3)-[FY]-[LIVM]-x(2)-[ACV]-x(2)-[LM]-x(2)-[FY]-G-x-[DENQST]-[LIVMFYS]  其中，X代表任意一个氨基酸。

带蛋白4.1家族是在红细胞质膜上连接血影蛋白和肌动蛋白的，它与血型糖蛋白有着密切的关系。它在构成红细胞的细胞骨架、细胞之间的粘附、细胞的游动(无论是直接或是间接由质膜上的肌动蛋白肌原纤维细丝引起的)这些行为中起着关键性的作用。

本发明的多肽含有上述带蛋白4.1家族的特征功能域，并且具有与带蛋白4.1家族成员相似的生物学功能，因而被认为是带蛋白4.1家族的新成员，在构成红细胞的细胞骨架、细胞之间的粘附、细胞的游动中起着关键性的作用。若表达异常，则会影响细胞骨架的正常生理活动，破坏细胞的一系列生命活动，引起功能紊乱，导致各种疾病的发生。

由于如上所述带蛋白4.1家族-14.85蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的带蛋白4.1家族-14.85蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新带蛋白4.1家族-14.85蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——带蛋白4.1家族-14.85以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码带蛋白4.1家族-14.85的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码带蛋白4.1家族-14.85的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产带蛋白4.1家族-14.85的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——带蛋白4.1家族-14.85的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——带蛋白4.1家族-14.85的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与带蛋白4.1家族-14.85异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。