[发明专利]一种获取无毒有效蝎毒的生产工艺

说明书

本发明涉及一种获取无毒有效蝎毒的生产工艺，属于生命科学，医药技术领域，特别是用于癫痫、帕金森病等神经性疾病的防治。

东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch,BmK)具有镇静息风的功能，对惊厥、抽搐有显著疗效。蝎毒(Scorpion venom,SV)是蝎尾节毒腺排放的毒液，是蝎子捕食御敌的武器。医学研究证明，全蝎的功用在于蝎尾，即SV。SV具有多种治疗作用，但严重的神经毒作用使其开发和应用受到极大的限制，因此寻找消除SV毒性而又保持其治疗活性的方法是目前的当务之急。用凝胶过滤及离子交换树脂等手段进行分离、纯化，回收率仅为0.305％，因此从1988年至今未见用此技术路线进行开发应用的报道。有人用上述类似技术将SV分离、纯化后拟用于肿瘤的治疗一但由于其毒副作用仍然存在，至今未见开发成功。新药的安全性是其开发应用的最关键前提。

我们以往的工作证实，通过口服途径给药可大幅度降低SV的毒性。SV半数致死量(LD₅₀)的测定结果表明，小鼠口服或经腹腔注射途径给药，其LD₅₀分别为5.48g/kg体重和6.80mg/kg。尽管经口服途径给药的毒性作用已大大降低，但毒性成份仍在其中。

本发明的目的在于提供一种获取无毒有效蝎毒的生产工艺，即是在口服前将SV的毒性降到尽可能低的程度。

本发明的目的是通过下述技术方案实现的：

以往(包括我们自己)SV工艺的每个环节都严格注意低温，包括采集到的SV液，必须经冷冻干燥后，避光4摄氏度保存。本发明用高温(100摄氏度)处理SV1.0小时，其神经毒作用开始明显降低，2.5小时以上，可消除其毒性，但仍能保存抗癫痫作用的生物活性，而且，随高温处理时间的延长，SV中具有抗癫痫作用的组份所占百分比增加。

本发明的生产工艺如下：

1、采集蝎毒(SV)；

2、加蒸馏水后，分离，取上清液；

3、加热上清液，加热温度为100摄氏度，加热时间至少为2.5小时，加热方式为煮沸，即将盛装上清液的容器置于沸水中，武火煮沸，制得无毒SV水提液；

4、将上述无毒SV水提液(原料药)与药物辅料制成片剂或胶囊。

本发明提供了一种获取安全且具有新的医疗用途的蝎毒制剂的工艺(国内外均未见报导)，该药对各种兴奋性神经毒引起的脑损伤均有治疗作用，包括癫痫、帕金森病、脑血管病以及老年性痴呆等。

图1为SV的毒性取决于加热(100摄氏度)时间数据图表。

图2为SV的毒性取决于加热的温度和方式数据图表。

图3为SV及其有效组分对抗PTZ作用(发作例数)数据图表。

图4为SV及其有效组分对抗PTZ作用(发作严重程度)数据图表。

图5为一次口服SV对PTZ模型的治疗作用数据图表。

图6为一次口服SV对PTZ模型的治疗作用(程度/时间关系)数据图表。

图7为癫痫大鼠SV处置3周后疗效观察数据图表。

图8、图9为本发明组分分析及功能组分的确定示意图。

图10为KA诱导癫痫反复发作及SV的治疗机制方框图。

图11为SV对再次阈下剂量KA诱发癫痫发作潜伏期的影响示意图。

图12为SV对再次阈下剂量KA诱发癫痫发作持续时间的影响示意图。

图13为SV对再次阈下剂量KA诱发癫痫发作严重程度的影响示意图。

图14为SV对再次阈下剂量KA诱发癫痫发作次数的影响示意图。

下面结合实施例及附图详细描述本发明：

实施例：

用电刺激法从东亚钳蝎(Bmk)蝎尾采集蝎毒(SV)，加等量蒸馏水后，4000×g离心5分钟，取上清。将不同浓度的SV按同等容积分装并置入同样规格的耐热离心管中。将上述各管放置在沸水中，然后在武火煮沸的沸水中分别放置0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5和4小时。结束后再次400×g离心5分钟，取上清。对经上述方法处理后的SV-进行毒力测定，并与不同加热温度(40摄氏度、60摄氏度、80摄氏度)和100摄氏度烤箱烘烤4小时、8小时的处理组进行对照。结果表明，SV的毒性取决于加热的温度及其时间和方式(见图1和图2)。然后，将上述无毒SV水提液(原料药)与辅料β环虎精可压性淀粉制成斯威片(或胶囊)。

如图1所示，SV的毒性取决于加热(100摄氏度)时间，动物为昆明种小鼠。