[发明专利]从转基因抗菌肽蝇蛆中制备人用基因抗菌肽药品及其用途

说明书

昆虫(家蝇)虽然没有完善的免疫防御体系，但却具有高效的无细胞免疫系统。抗菌肽是昆虫(家蝇)免疫后血淋巴中的一类抗菌多肽，它具有分子量小，热稳定，水溶性好，无免疫原性，抗菌谱广等特点。现在，它被认为是从细菌到高等哺乳动物普遍存在的一类防御性多肽，称之为“第二防御体系”。抗菌肽不仅抗菌谱广，而且可以抑杀某些真菌、病毒及原虫，并对多种癌细胞及动物实全瘤有明显的杀伤作用，而不破坏正常细胞。

抗菌肽即将成为一代新的抗菌、抗病素、抗癌药物。但天然抗菌肽的来源少，成本高，无法满足临床应用的需要。因此我们通过DNA重组技术实现转基因抗菌肽蝇蛆繁育家蝇收集蝇蛆获得大量抗菌肽已成为现实。

从转基因抗菌肽蝇蛆中提取、纯化出人用基因抗菌肽药物代替抗菌素对感染性疾的应用。其主要特点有：一是抗菌谱广，对很多病菌均有作用，而且疗效确实；二是无抗药性，不存在用药不合理很快产生抗菌性；三是几乎无毒副作用，分子量小，无过敏原，不需做过敏性试验；四是小分子耐热，性能稳定，有效期长，易于贮存、保管；五是用量小，以微克计算，而且可作用于多种途径如静注、肌注、口服、喷雾、皮渗，栓剂等；六是对病毒性疾病也有很好的作用。

一、目前抗菌素存在的主要问题：

抗菌素是指由细菌、霉菌或其它微生物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类物质。自1940年青霉素应用于临床到现在抗生素已达上千种。在临床上常用的亦有几百种。其主要是从微生物的培养液中提取的或者用合成、半合成方法制造。大致可分以下几类：

1、B-内酰胺类青霉素和头孢菌素类的分子结构中含有B-内酰胺环。近年来又有较大发展，如硫酶素类(thienamycins)、单内酰环类(monobactams)，B-内酰酶抑制剂(B-lactamade inhibitors)等。

2、氨基糖甙类，包括在链霉素、庆大霉素、卡娜霉素、妥布霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、核糖霉素等。

3、四不素类，包括四环素、土霉素、金霉素及强力霉素等。

4、氯霉素类，包括氯霉素、甲砚霉素等。

5、大环内脂类，临床常用的有红霉素、白霉素、无味红霉素、乙酰螺旋霉素、殚迪霉素、交沙霉素等。

6、作用于G+细菌的共它抗生素，如林可霉素、氯林可霉素、万古霉素、杆菌肽等。

7、作用于G菌的其它抗生素，如多粘菌素、磷霉素、卷霉素、环丝氨酸、利福平等。

8、抗真菌抗生素如灰黄霉素。

9、抗肿瘤抗生素如丝霉素、放线菌素D、博莱霉素、阿霉素等。

10、具有免疫抑制作用的抗生素如环孢霉素。

以上十类抗生素约几百种，给患者和临床医生眼花缭乱，如何合理选择实属难题。耐药细菌的急剧增长。一般来说，几乎所有临床医师都基本了解抗生素在应用过程中都可能出现的不良反应。这些不良反应在体内过程与疗效关系都难判定。如B-内酰胺类的致敏性；氨基糖甙类的耳毒性，五环内脂抗生素在临床上应用量大，面广、品种多、更新快、各类药品之间相互作用关系复杂，因此抗菌药物临床应用发生率及耐药性仍然逐年增加。这些问题的发生，主要由抗生素本身决定的。所有抗生素临床选用很难，急需用换代产品来替代抗生素的应用。药物的有效选择、合理应用理论讲是可行的，实际应用太难了。而合理使用抗生素需具体病人制定出个体化治疗方案。绝没有一个固定的方案可以在不同的情况下沿用。

二、基因人用抗菌肽药物的有效性和安全生

1、抗菌肽的抗感染作用：抗菌肽的主要作用和生物学效应在它的名称上已有体现，研究发现不同来源的抗菌肽均具有广谱抗菌作用。对革兰氏阳性菌和阴性菌均有杀伤作用。实验证实对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、念珠球菌、绿脓杆菌、结核杆菌、肺炎克雷氏菌、粘质沙雷氏菌、变形杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、粪链球菌都有很好的抗菌效果。对治疗创伤、烧伤等细菌感染和败血症休克有很好的治疗作用，对病毒、真菌、原虫也有杀伤和抑制作用。

2、抗菌肽遗传毒理学实验安全。

经用Ames试验、啮齿动物微核试验和睾丸细胞染色体畸变试验，证明抗菌肽的遗传毒理学效应安全可靠，测试抗菌肽对小鼠无蓄积毒性。

三、抗菌肽的作用机理