[发明专利]桂竹香外膜蛋白基因克隆的方法无效
| 申请号： | 01106407.2 | 申请日： | 2001-01-02 |
| 公开（公告）号： | CN1362517A | 公开（公告）日： | 2002-08-07 |
| 发明（设计）人： | 李旭锋;刘天艳;王劲;袁旭 | 申请（专利权）人： | 成都天友发展有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 武汉科宏专利事务所 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 桂竹 膜蛋白 基因 克隆 方法 | ||
1、一种桂竹香外膜蛋白基因克隆的方法，包括下列步骤：
(1)一步法提取桂竹香幼叶总RNA；
(2)利用总RNA直接进行反转录，并用LD-PCR方法构建桂竹香苗期cDNA文库；
(3)利用同源序列设计并合成同源探针；
(4)用地高辛标记同源探针，噬菌斑原位杂交方法筛选桂竹香苗期cDNA文库；
(5)利用PCR的方法快速筛选并确定阳性克隆；
(6)限制性酶切分析，Sourthen杂交分析确定为重组子；
(7)测序，并通过Bioinfomatics分析，确定桂竹香外膜蛋白基因序列。
2、按权利要求1所述的一种桂竹香外膜蛋白基因克隆的方法，其特征是桂竹香外膜蛋白基因序列是：GGCCATTATGGCCGGGGGTTGAAGTGAAGAAGAAACTGCAGCAATGGAGAAATCAGGAGATGATGTCAAATTCCCAAAACTGGAGAAACCTACAGGAAAGAAACAGACAGCGACGGTTGTTGTGGGAGTGTTGGCCGTGGGATGGTTGGCGATAGAGCTCGTGTTTAAGCCATTGTTCAAGAAGCTGAGCTCCGCTAAGGACAAATCCGATTCGGACGATGCCAGTGCCACCGCTCCTCCTCCCGCGTCGGACGCCTGAATTGGTGAGAATTATAAAGTCGACACGTGGAGGTCTTAATTACTTTTTTCTTAATGAAGGCTCATATTAAAAGCAAAATGTTGTGTGTTCTTTCCTTGCTTCGTTTGTAATATCGTTCGGTTTTACTTCTTTTGACGATGTTTTTAATTAATCTCCCTTTCCCTTTTCAATAAAATCCCGAGAGAAGGATTAATAAATCAATGAGATACGATGTACTAATTGGGTTTCACAAAACACCCCCCCCNCCCACCAAAAACCATGTCGGCCGCCCTCGGCCCCA
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