[发明专利]与人CD95结合的多肽基序及其多肽

说明书

本发明涉及与人细胞膜蛋白分子CD95结合的多肽基序及其多肽分子，特别是与CD95胞外区结合的功能性多肽。此外，本发明涉及编码这些多肽的DNA、RNA。由于这些多肽与CD95分子胞外区的结合位点进行结合，可阻断或诱导细胞引发自身死亡程序而使细胞死亡，因此本发明还涉及这些多核苷酸和多肽在制备可用于诊断和治疗与CD95系统相关的疾病的试剂或药品中的应用。

自1980年Wyllie首次提出细胞程序性死亡的概念(Wyllie-AH,Glucocorticoid-induced thymocyte apoptosis is associated withendogenous endonuclease activation.Nature.1980 Apr 10；284(5756):555-6)以来，人们逐渐认识到，细胞程序性死亡是多细胞生物体内普遍存在的细胞死亡方式。多细胞生物体依靠细胞程序性死亡，与细胞增殖和分化共同平衡着体内细胞的数量和种类，保证生物体正常的发育和生理过程。这种通过激活自身的死亡程序杀死自身的死亡方式，具有特征形态的典型变化，又称做细胞凋亡。启动细胞凋亡的关键性蛋白分子是细胞表面膜蛋白分子CD95，常称做Fas或死亡分子。[Itoh-N；Nagata-S；Cell.1991 Jul 26；66(2):233-43]，一旦CD95与其天然配体结合后，便可激活该细胞的死亡程序来消除自身。由此可见，正常凋亡功能是机体一切正常活动的根本，临床上也常观察到：不能正常进行细胞凋亡过程的个体常伴有重大疾病的发生，如癌症、自身免疫性疾病和病毒感染等。此外，许多以细胞退化作为特征的疾病如神经退化性失调、获得性免疫缺陷综合症等，也存在细胞凋亡加速的作用。其中，CD95系统扮演着重要的角色。

CD95所诱导的细胞凋亡与多种疾病密切相关，所诱导凋亡的水平高低直接影响着疾病的发生、发展和愈合。例如，病毒感染性疾病的一个典型例子便是AIDS[J.Clin.Invest.102,79(1998)；Adv.Cancer Res.,78,159(2000)]。患者体内由HIV直接感染而引起的CD4^*细胞死亡，仅占被破坏的CD4⁺细胞中的少数。而大量CD4⁺细胞的死亡是通过凋亡而消除的：HIV病毒表面蛋白gp120与人体内细胞表面CD4分子结合，并刺激感染细胞产生多种细胞因子，这些细胞因子或HIV感染又进一步促进细胞表达CD95增加，从而导致细胞走向凋亡。病毒性肝炎，包括慢性乙肝患者和丙肝患者的肝细胞损害也与T淋巴细胞使用CD95受体-配体系统诱导凋亡有关[Galle-PR,J-Exp-Med.,182(5):1223,1995；Taya-N,Br-J-Haematol.,110(1):89,2000；Ryo-K,Am-J-Gastroenterol.,95(8):2047,2000；Viral.Hepat.,4,303,1997]。在病毒感染的肝脏中，浸润淋巴细胞识别肝细胞表面病毒抗原而受到活化并表达CD95L，对CD95表达增强的肝细胞进行凋亡诱导而杀死肝细胞[Hayashi-N,J-Viral-Hepat.,6(5):357,1999]。另外，凋亡的调控功能失常与肿瘤的发生关系密切。机体突变细胞往往异常增生而CD95诱导凋亡的功能下降，使之存活而发生肿瘤。良性肿瘤向恶性肿瘤转化时，也常常是由于恶性肿瘤细胞死亡速率下降所致。用CD95系统可诱导成人T细胞白血病细胞系发生凋亡[Debatin,Blood.81(11):2972,1993]，这些实验结果提示调控CD95诱导凋亡的作用可以作为肿瘤治疗的一个新思路。此外，目前许多中枢神经退行变性疾病，包括老年性痴呆、Alzheimer和帕金森综合症(Parkinson)，多是由于神经系统的细胞凋亡过多，是正常神经组织细胞也通过凋亡而消除，影响了神经系统的功能，导致神经退化性疾病[Mogi-M,Neurosci-Lett.,220(3):195,1996；Hartmann-A,Ann-Neurol.,44(3):425,1998；Sohn-YK,J-Neurol-Sci.,152(1):73,1997；Nishimura-T,Brain-Res.,695(2):137,1995]。