[发明专利]对虾胚胎白斑综合症病毒脱毒技术

说明书

本发明属于对虾及苗种生产技术中的病害防治技术，是在对虾苗种规模生产中对白斑综合症病毒(WSSV)的一种脱毒技术方法。

本发明做出之前，国内外都有类似方面的报道和研究，如日本桃山和夫的《数种消毒剂のクルマェヒの受精卵ぉょびノウブリウスに对する毒性》和山东省海水养殖研究所李天保的《碘消毒剂预防对虾暴发性流行病的试验》(1996)等。他们主要是利用碘消毒剂(聚乙烯吡咯烷酮碘)对对虾受精卵、无节幼体、蚤状幼体、糠虾幼体和仔虾幼体的毒性对比和影响受精卵孵化率方面进行了研究，但仅限于试验规模。目前，尚未见有用于生产规模的对虾胚胎白斑综合症病毒脱毒技术的研究内容。

本发明的目的是提出一种技术操作程序简单、适用于规模生产、利用有机碘灭杀对虾胚胎白斑病毒的技术，切断该病毒的垂直传播，提供无病毒高健康的对虾苗种。

本发明是按以下技术操作程序完成的：首先将卵子收集在一个较大的容器内并用气石伴以微充气，拂去表面的杂质并使卵子达到合理密度，根据卵子液体的量以一定浓度用滴管取出有机碘溶液。向桶内缓缓滴入药液并搅动使药物作用均匀。经过一段时间，用软管将桶内卵子虹吸到150目的筛绢网袋内，再在装有与孵化池等温海水的容器内冲洗3-4次。然后，将冲洗后的卵子放入孵化池孵化培育。

卵子密度为500-800粒/毫升；

有机碘溶液为碘伏，还可用聚乙烯吡咯烷酮碘等；

用药浓度为5-101ppm(有效碘含量)；

药物作用时间(即从放药到将卵子虹吸到150目的筛绢网袋内这段时间)为10-15分钟。

下面通过实施例详细叙述本发明的大规模苗种生产胚胎的脱毒技术：

白斑病毒(WSSV)不是经过生殖细胞而构成的对对虾病毒的垂直传播，而是从母体经外界介质而构成的垂直传播。因此，于2000年在中国对虾和日本对虾苗种生产中进行了该病毒的脱毒生产试验和检测。

一做好本发明技术的前处理工作，保证卵子质量

卵子质量是胚胎脱毒处理和苗种培育的保证条件，其质量主要指好卵率、受精率和同步发育性，而影响这些因素的主要是亲虾选择及日常管理。一般好卵率和受精率要求在70％-80％以上，同步发育性尽可能一致，避免卵胚胎和幼体参杂，给胚胎脱毒处理及苗种培育带来困难。

二本发明技术的具体操作程序

首先将卵子收集在一个较大的容器内，容器常用0.2立方米圆形玻璃钢桶或塑料桶，并用气石伴以微充气，用手抄网拂去表面的杂质。之后，检测卵子密度是否达到500-800粒/毫升。根据卵子液体的量以有效碘含量5-10ppm浓度用滴管取出有机碘溶液，将气石移出后向桶内缓缓滴入药液并搅动使药物作用均匀，同时开始计时。经过一段时间，用软管将桶内卵子虹吸到150目的筛绢网袋内。从放药到将卵子虹吸到150目的筛绢网袋内这段时间应为10-15分钟。再在装有孵化池等温海水的容器内冲洗3-4次，注意不要用手挤压网袋内的卵子。然后，将冲洗后的卵子放入孵化池孵化培育。

1.卵子收集

1)收集时间：亲虾产卵时间主要集中在零点至第二天早晨3点之间。所以，收集卵的最佳时间为早晨5点至7点。

2)收集密度：这里是指将卵从亲虾产卵车间收集后放到一容器内进行处理的密度。生产中经过多次试验认为最佳密度为500-800粒卵/每毫升，密度过高操作中容易造成卵胚胎缺氧而影响孵化率，密度过低会增加脱毒处理的工作量。

2.合理用药技术

1)用药浓度和时间：我们以有机碘(碘伏)进行了实验室和生产试验(见表1)。