[发明专利]三七多糖的提取分离方法

说明书

本发明属于药物化学领域，具体地说，属于药用植物三七多糖的提取分离方法。

三七(Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen)，又名田七，为五加科(Araliaceae)人参属(Panax Linn.)植物，主要栽培于云南文山和广西百色地区，是我国著名的珍贵药材，具有止血、散淤、消肿、止痛等功效近年，三七的研究与开发日益受到重视。三七化学成分复杂，从30年代就进行了研究，但直到70年代以后随着植物配糖体的分离和化学结构鉴定技术的发展，才有了显著的进展。研究结果表明，三七中含有皂甙、黄酮、氨基酸、多糖、脂肪酸、脂肪族炔烃类及肽类化合物等，在医药品和天然保健品方面均有重要的开发价值。其中，达玛烷型四环三萜类皂甙被认为是三七的主要生理活性成分之一。所以，以往的研究主要集中于三七皂甙方面，对三七的多糖成分研究很少，本发明的三七多糖的提取分离方法在现有技术中未见有报道。

本发明的目的在于提供一种三七多糖的提取分离方法，该方法以中药三七为原料生产三七多糖，增加了三七原料的综合利用，降低多糖的杂质，减少了溶剂用量，降低了成本，同时提高了生产效率，适合于大规模生产。同时，本发明还提供了上述方法得到的三七多糖在制备抗肿瘤药物中的应用；三七多糖在制备增强免疫活性药物中的应用以及三七多糖在制备抗肝炎药物中的应用。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

三七多糖的提取分离方法，取三七根，经粉碎后用沸水提取，提取液离心或过滤，清液浓缩后加二倍体积乙醇沉淀，收集离心或过滤后的沉淀，干燥后得三七多糖。

上述方法中，三七根粉碎后用沸水提取三次，冷却后过滤去除沉淀，清液薄膜浓缩至小体积，加二倍体积的乙醇混合，静置一小时后9000rpm离心10分钟，收集沉淀，沉淀干燥得三七多糖。

上述方法中，三七根粉碎后用沸水提取三次，冷却后过滤去除沉淀，清液喷雾干燥得干粉，干粉溶于沸水，离心去沉淀，清液加二倍体积的乙醇混合，静置一小时后9000rpm离心10分钟，收集沉淀，干燥得三七多糖。

同时提供了三七多糖的另一种提取分离方法，取三七根，经粉碎后用乙醇提取，乙醇提取液用于制备三七皂甙，残渣再用沸水提取，水提液离心或过滤，清液浓缩后加二倍体积乙醇沉淀，收集离心或过滤后的沉淀，干燥后得三七多糖。

上述方法中，三七根粉碎后以70％乙醇回流提取，残渣干燥后用沸水提取三次，冷却后过滤去除沉淀，清液薄膜浓缩至小体积，加二倍体积的乙醇混合，静置一小时后9000rpm离心10分钟，收集沉淀，沉淀干燥得三七多糖。

上述方法中，三七根粉碎后以70％乙醇回流提取，残渣干燥后用沸水提取三次，冷却后过滤去除沉淀，清液喷雾干燥得干粉，取干粉溶于沸水，离心去沉淀，清液加二倍体积的乙醇混合，静置一小时后9000rpm离心10分钟，收集沉淀，干燥得三七多糖。

同时，本发明还提供了用上述方法得到的三七多糖在制备抗肿瘤药物中的应用；三七多糖在制备增强免疫活性药物中的应用以及三七多糖在制备抗肝炎药物中的应用。

为了体现本发明与现有技术相比所存在的优异性，下面将用本发明的原理以及本发明提取分离出的产品的药理学试验结果来说明其优异性和用途：

1、本发明的原理：本发明技术方案的提出是根据多糖可溶于水而不能溶于醇的原理利用乙醇沉淀的方法来提取三七多糖的。

2、三七多糖的药理学试验结果：

用本发明的提取分离方法得到的三七多糖进行药理学试验，初步研究结果表明三七多糖对CCl₄所致的昆明小鼠肝损伤具有明显的保护作用，对动物移植性肿瘤S₁₈₀实体型生长具有明显的抑制作用，对动物移植性肿瘤肝癌(H₂₂)实体型生长具有明显的抑制作用，还具有显著的增强免疫活性及抑制肝炎病毒的活性，其毒理学试验也证明了其安全性，具有很好的应用前景。

2-1.三七多糖对四氯化碳肝损伤的保护作用

经初步实验结果表明：给动物腹腔注射，三七多糖剂量分别为75mg/kg及150mg/kg，每日一次，连用三天，对四氯化碳(0.1％，10mg/kg)所致的昆明小鼠肝损伤具有一定的保护作用。以测定血清中谷丙转氨酶(ALT)为评价指标。模型组ALT136.7±15.6u；多糖剂量大小分别依次为58.0±22.3u及80.2±19.7u，与模型组(CCl₄)相比，差异有显著性(p＜0.05)。

2-2.三七多糖对动物移植性肿瘤生长的影响