[发明专利]大蹼铃蟾缓激肽及其制备方法和其基因无效
| 申请号： | 01108522.3 | 申请日： | 2001-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN1390848A | 公开（公告）日： | 2003-01-15 |
| 发明（设计）人： | 张云;赖仞;刘衡;李文辉 | 申请（专利权）人： | 中国科学院昆明动物研究所 |
| 主分类号： | C07K7/00 | 分类号： | C07K7/00;C07K1/14;C12N15/11;C07H21/00 |
| 代理公司： | 昆明大百科专利事务所 | 代理人： | 杨宏珍 |
| 地址： | 650223 *** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 大蹼铃蟾缓激肽 及其 制备 方法 基因 | ||
1，大蹼铃蟾缓激肽，其特征是从中国两栖类动物大蹼铃蟾皮肤分泌物中分离得到的由19个氨基酸组成的一种单链多肽，分子量2180，等电点11.7，多肽氨基酸全序列一级结构为：天冬氨酸-亮氨酸-脯氨酸-赖氨酸-异亮氨酸-天冬酰胺-精氨酸-赖氨酸-甘氨酸-脯氨酸-精氨酸-脯氨酸-脯氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-丝氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸-精氨酸。
2，大蹼铃蟾缓激肽的制备方法，其特征是将活体大蹼铃蟾用水清洗干净，置于带盖的玻璃容器中，滴加无水乙醚，密闭容器3-5分钟，可见大量的泡沫状物质从大蹼铃蟾皮肤分泌出来，收集分泌物，离心去除沉淀、冷冻干燥后，经凝胶过滤、高压液相反相柱层析分离纯化后即得到。
3，大蹼铃蟾缓激肽基因核苷酸序列，其特征在于cDNA由829个核苷酸组成，包括从第140一196，224-280，308-364，392-448，476-532，560-616位核苷酸的6个重复单元片段，其自5’端至3’端序列为：
GTCACTTCCAGCTCTGATCATGAGACTGTGGTTCTGTCTAAGTTTCTTCATTGTCCTGTG
CCTGGAGCATTTTCCAGAAACCCTGGCAGATGAAAGGAATGTTCCAGAGAGTGAAGAAAA
AACTGAGCAGTACCTGAGGGATTTGCCTAAGATCAACCGCAAAGGACCACGTCCACCGGG
GTTCTCCCCTTTTCGAGGAAAATTCCATAGCCAGTCCCTGCGGGATTTGCCTAAGATCAA
CCGCAAAGGACCACGTCCACCGGGGTTCTCCCCTTTTCGAGGAAAATTCCATAGCCAGTC
CCTGCGGGATTTGCCTAAGATCAACCGCAAAGGACCACGTCCACCGGGGTTCTCCCCTTT
TCGAGGAAAATTCCATAGCCAGTCCCTGCGGGATTTGCCTAAGATCAACCGCAAAGGACC
ACGTCCACCGGGGTTCTCCCCTTTTCGAGGAAAATTCCATAGCCAGTCCCTGCGGGATTT
GCCTAAGATCAACCGCAAAGGACCACGTCCACCGGGGTTCTCCCCTTTTCGAGGAAAATT
CCATAGCCAGTCCCTGCGGGATTTGCCTAAGATCAACCGCAAAGGACCACGTCCACCGGG
GTTCTCCCCTTTTCGAGGAAAATTCCATAGCCAGTCCCATGTATGAAATCAAGCAGTTCA
AAACTGCACACGGACGCCCACCGATCTGCGCTCCGGGTGAGCAGTGTCCGATATGGGTTG
GGAAGTAGCGTCCCCTGATATAAATAAGCATTGTTATGTCACCTCTGTAATACCAGCTCT
GACTGACATGGTTTATTAAACAGCAGATTTGTGCTCTCAAAAAAAAAAA
4，根据权利要求3所述的大蹼铃蟾缓激肽基因核苷酸序列，其特征在于，编码成熟大蹼铃蟾缓激肽为第140-196，224-280，308-364，392-448，476-532，560-616位6个核苷酸重复单元片断，其氨基酸序列均为：
DLPKINRKGPRPPGFSPFR
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