[发明专利]一种多肽——人肿瘤内皮标记－30.69和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人肿瘤内皮标记-30.69，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

肿瘤的生长需要血液供应。目前，在肿瘤血管生成方面的研究已经相当深入。然而，仍然有几个基础性的问题没有解决。例如，肿瘤血管内皮是否与正常组织的内皮具有本质上的区别，肿瘤血管生成与创伤愈合或其他生理过程的关系如何等。这些问题的答案与抑制肿瘤特异性血管生成的新型治疗剂密切相关。

为了获得对肿瘤血管生成的分子水平上的理解，确定肿瘤特异性的血管生成标记是否存在，我们选取正常的和恶性结肠组织血管内皮细胞，将它们的基因表达模式进行比较。在170多个在内皮中优势表达的转录物中，79个表现出分化表达，其中有46个在肿瘤相关的内皮中异常增加。在这些基因中，有几个编码细胞外基质蛋白，但其中绝大多数的功能仍然未知。在这些肿瘤内皮标记中，绝大多数在大范围的肿瘤类型中都有表达，它们在创伤愈合时也有表达。这些研究表明，肿瘤和正常内皮在分子水平上有着明显的区别，这一发现对抗血管生成疗法的发展具有重要意义。(St.Croix，B.，et al.，Science 289(5482)，1197-1202，2000)

本发明的人的基因与人肿瘤内皮标记7基因在蛋白水平上有53％的同一性和68％的相似性。故认为本发明的新基因为肿瘤内皮标记基因，命名为人肿瘤内皮标记-30.69。并以此推断其与人肿瘤内皮标记7相似，同为肿瘤内皮标记家族的成员，并具有相似的生物学功能。对肿瘤内皮标记的深入研究将对肿瘤的诊断和治疗具有重要意义。

由于如上所述人肿瘤内皮标记-30.69蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人肿瘤内皮标记-30.69蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人肿瘤内皮标记-30.69蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人肿瘤内皮标记-30.69以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肿瘤内皮标记-30.69的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肿瘤内皮标记-30.69的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人肿瘤内皮标记-30.69的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人肿瘤内皮标记-30.69的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽一—人肿瘤内皮标记-30.69的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人肿瘤内皮标记-30.69异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中106-945位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1356位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人肿瘤内皮标记-30.69蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。