[发明专利]一种多肽——呼吸链脱氢酶－11.55和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——呼吸链脱氢酶-11.55，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

呼吸链NADH脱氢酶：泛醌氧化还原酶，又称呼吸复合体I，是呼吸链中最复杂的酶系。其作用是催化NADH的2个电子转移至泛醌。复合体I横跨线粒体内膜能使质子移位从基质(M)侧面至细胞质(C)侧面，因此它也是质子移位体。黄素单核甘酸(FMN)和一个尚未知具体数目的铁硫蛋白簇作为电子传递途径的辅基，在线粒体内膜以二聚体形式存在[Uwe Weidner，Stephan Geier，Arne Ptock，Thor sten Friedrichet al.，1993.J.Mol.Biol.233：109-122]。此复合物可被分解为水溶性黄素蛋白、水溶性铁硫蛋白和不溶性水的部分(含磷脂、铁及对酸不稳定的硫)。

真菌NADH脱氢酶至少由30个不同的亚基组成，哺乳动物则至少由41个亚基组成。不管是真菌还是哺乳动物，其NADH脱氢酶都含有7个疏水性最强的亚基，即ND1到ND6和ND4L，这7个亚基都是由线粒体基因编码并在线粒体中合成的。电镜显示N.Crassad的NADH脱氢酶呈现一个不同寻常的L型结构，并且其外部突进线粒体基质并成为膜的固定组成[Hofhaus，G.，Weiss，H.&Leonard，K.1991.J.Mol.Biol.221，1027-1043]。NADH脱氢酶是一个寡霉素酶复合体，位于线粒体内膜(在藻青菌中亦可能位于叶绿体中)。NADH脱氢酶的组成亚基中，有一个51kd的亚基是所有亚基中第二大的亚基，并且是铁硫蛋白的组成成分之一。该亚基可能结合NAD，FMN和一个2Fe-2S蛋白簇。

NADH脱氢酶的51kd亚基和细菌脱氢酶α亚基包含3个相似的区域。第一个最可能对应于NAD结合位点，第二个对应于FMN-结合位点，第三个包含3个半胱氨酸，对应于铁硫结合位点。其中对应于FMN结合位点和2Fe-2S结合位点有如下两个特征模式序列：[1]G-[AM]-G-[AR]-Y-[LIVM]-C-G-[DE](2)-[STA](2)-[LIM](2)-[EN]-S[2]E-S-C-G-x-C-x-P-C-R-x-G，其中3个C是可能的2Fe-2S的配基。

本发明的多肽含有上述保守的特征功能域，并且具有与呼吸链NADH脱氢酶家族成员相似的生物学功能，因而被认为是呼吸链NADH脱氢酶家族的新成员，在呼吸链电子传递中起重要作用。若发生突变或表达异常，则会影响呼吸链电子的正常传递和能量的正常产生，破坏生物体的一系列氧化/还原反应，引起生物功能紊乱，导致肿瘤等各种疾病的发生。

由于如上所述呼吸链脱氢酶-11.55蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的呼吸链脱氢酶-11.55蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新呼吸链脱氢酶-11.55蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——呼吸链脱氢酶-11.55以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码呼吸链脱氢酶-11.55的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码呼吸链脱氢酶-11.55的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产呼吸链脱氢酶-11.55的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——呼吸链脱氢酶-11.55的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——呼吸链脱氢酶-11.55的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与呼吸链脱氢酶-11.55异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；