[发明专利]一种多肽——人精子发生相关因子－86.90和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人精子发生相关因子-86.90，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在对化学药品致癌作用的研究中，我们发现了一个新的精子发生相关因子SPAF(spermatogenesis associated factor)。研究发现，SPAF在无性生殖系的表皮的恶性转化阶段异常表达。序列分析显示，SPAF含有两个ATP酶模块，因此将此基因归为AAA蛋白家族(ATPase associated with diverse activities)的新成员。AAA蛋白家族是一个与分化相关的超家族。

用SPAF抗体对鼠睾丸部分进行免疫组织化学染色，发现SPAF在精原细胞和输精管基底室中的初级精母细胞中表达。用Northern和Western方法对不同发育阶段的鼠睾丸进行检测，结果进一步证实了SPAF在精子发生的初期表达。SPAF具有一些功能域：一个类似的线粒体定位信号，其一段序列与膜耦联蛋白相似，ATP结合功能域，它在睾丸细胞内表达。由此我们得出，在精子形成过程中，SPAF蛋白可能参与线粒体结构和功能的转变。SPAF基因在恶性表皮细胞中的异常表达会诱导早期的精细胞向恶性方向发展。(Yuangang Liu，et al.，Oncogene，19：1579-1588，2000)

本发明的人的基因与精子发生相关因子基因SPAF在蛋白水平上有84％的同一性和90％的相似性。且两者均含有AAA蛋白家族的特征性结构域ATP酶功能域。基于以上各点，故认为本发明的新基因为精子发生相关因子基因，命名为{人精子发生相关因子-86.90}。并以此推断其与精子发生相关因子SPAF相似，同为AAA蛋白家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人精子发生相关因子-86.90蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人精子发生相关因子-86.90蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人精子发生相关因子-86.90蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人精子发生相关因子-86.90以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人精子发生相关因子-86.90的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人精子发生相关因子-86.90的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人精子发生相关因子-86.90的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人精子发生相关因子-86.90的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人精子发生相关因子-86.90的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人精子发生相关因子-86.90异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少84％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中44-2416位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2532位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人精子发生相关因子-86.90蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。