[发明专利]一种多肽——脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白－10.45和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

在生物进化过程中，细胞都演化出一系列的DNA修复途径以抵御各种类型DNA损伤的有害影响。当细胞受到严重损伤时，为了防止死亡，生物体采取一种保真度极大降低的修复方式—SOS修复，它允许新生的DNA链越过胸腺嘧啶二聚体而生长，这是一个错误潜伏的过程，其原则为：丧失某些信息而存活总比死亡好。这种修复与切除修复不同，切除修复系统的酶在正常细胞中就已存在，而SOS修复的酶类只到细胞受到损伤时才出现。脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白(RecA蛋白)是SOS修复过程的重要组分，在SOS反应中起着核心作用。

细菌RecA蛋白是同源重组合DNA损伤重组修复所必需的蛋白。RecA蛋白约有350个氨基酸残基组成，在真细菌中其序列高度保守，含有下列一致序列：A-L-[KR]-[IF]-[FY]-[STA]-[STAD]-[LIVMQ]-R。该酶也存在于植物叶绿体中(Cerutti H.D.，Osman M.，Grandoni P.，Jagendorf A.T.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.89：8068-8072(1992))。RecA具有多种活性：它能与单链和双链DNA结合(具单链DNA结合活性)；能结合并使ATP水解；它还是一重组酶(具重组活性)；而且它还具有蛋白酶活性，是一种特异的内肽酶，其蛋白酶活性只作用于少数几种蛋白质的丙氨酸-甘氨酸之间的肽键，将底物一分为二。该内肽酶活性使其能和lexA相互作用，通过使lexA自身催化裂解为两个片段而活化lexA蛋白，使其不再阻止SOS的基因的转录，因而就开启了SOS系统。

本发明新的多肽含有上述DNA严重损伤修复蛋白的特征功能域，并且具有与DNA严重损伤修复蛋白家族成员相似的生物学功能，因而被认为是DNA严重损伤修复蛋白(RecA)家族的新成员，在DNA损伤的SOS修复中起至关重要的作用。若表达异常，则会导致SOS修复启动失控，使DNA损伤无法修复，也会引起正常细胞的SOS修复，从而使DNA所携带的正常信息丢失，引起各种生物功能紊乱，导致肿瘤等一系列疾病的发生，甚至导致死亡。

由于如上所述脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与脱氧核糖核酸严重损伤修复蛋白-10.45异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。