[发明专利]一种多肽——腺苷酸激酶－9.79和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——腺苷酸激酶-9.79，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

腺苷酸激酶(EC 2.7.4.3)(AK)是一种小分子单体酶，催化MgATP和AMP的可逆转变(即MgATP+AMP＝MgADP+ADP)。在哺乳动物中存在三种同功酶：AK1(或肌激酶)存在于细胞质中；AK2存在于线粒体的外腔中；AK3(或GTP：AMP磷酸转移酶)存在于线粒体基质中，并且以MgGTP代替MgATP作为底物。腺苷酸激酶也存在于不同的细菌、植物和真菌中。(Schulz G.E.，Cold Spring Harbor Symp.Quant.Biol.52：429-439(1987).)

研究还发现两种酶与腺苷酸激酶进化相关。它们是：(1)酵母尿苷酸激酶(EC2.7.4.-)(UK)(基因URA6)，它催化一磷酸基团从ATP转移到UMP，形成UDP和AMP。(2)粘液菌UMP-CMP激酶(EC 2.7.4.14)，它催化一磷酸基团从ATP转移到CMP或UMP，形成CDP或UDP以及ADP。

腺苷酸激酶家族的一些区域高度保守，如ATP结合结构域。1987年，Schulz G.E.等发现一个高度保守的区域，含有下列特征性序列：[LIVMFYW](3)-D-G-[FYI]-P-R-x(3)-[NQ]，该区域包括一个天冬氨酸残基，该残基是AK催化活性中心裂口的组成部分，该区域还含有一盐桥。该保守区域也包括一个精氨酸残基，它的修饰引起该酶的钝化。但古细菌的腺苷酸激酶不属于该AK家族。

本发明的多肽含有上述保守的的特征功能域，并且具有与腺苷酸激酶家族成员相似的生物学功能，因而被认为是腺苷酸激酶家族的新成员，催化MgATP和AMP的可逆转变，产生ADP。若表达异常，则会影响MgATP和AMP的可逆转变，破坏生物体的一系列正常生命活动，引起生理功能紊乱，导致肿瘤等各种疾病的发生。

由于如上所述腺苷酸激酶-9.79蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的腺苷酸激酶-9.79蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新腺苷酸激酶-9.79蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——腺苷酸激酶-9.79以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码腺苷酸激酶-9.79的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码腺苷酸激酶-9.79的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产腺苷酸激酶-9.79的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——腺苷酸激酶-9.79的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——腺苷酸激酶-9.79的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与腺苷酸激酶-9.79异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中178-447位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1526位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制腺苷酸激酶-9.79蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。