[发明专利]一种多肽——β－人微管蛋白－11.44和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——β-人微管蛋白-11.44，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

本发明公开了一种新的多肽——β-人微管蛋白-11.44，编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于诊治多种疾病的方法，如周期性瘫痪、心律失常、支气管哮喘、消化性溃疡、糖尿病、胚胎发育畸形、肿瘤等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其诊治作用。本发明还公开了编码这种新的β-人微管蛋白-11.44的多核苷酸的用途。

运动是一切生命体最显著的特征之一。作为生物体基本单位的细胞，其多中多样的生理活动，如细胞形态的改变和维持、细胞内物质运输、内吞外排、免疫行为、细胞分裂等，无不伴随着各种形式的运动。细胞中的骨架系统是这种运动的基础。细胞骨架分为三种类型的蛋白质纤维：微丝、微管和中等纤维。

微管是真核细胞作独有并普遍存在的结构。在不同类型的细胞中微管具有相同的形态。大多数微管见于细胞质基质内，然而它们又是纤毛、鞭毛等运动器官完整组成的一部分，同时也是中心粒的组成部分。

微管是由管蛋白和少量微管结合蛋白的聚合作用而形成的。管蛋白以α和β管蛋白两种单体存在，装配成微管的天然亚单位是异二聚体。主要的装配方式是：现有一些二聚体形成短的原丝，经过在两端和侧面增加二聚体而使之扩展为片状带。当片状带加宽至13根原丝时，即合拢成一段微管。新的二聚体再不断加到这一段微管的端点，使之延长。低温，高的流体压力和高的钙离子浓度都是装配平衡倾向于解聚。研究发现在脊髓中的β-人微管蛋白家族编码的多肽在不同组织和细胞中的表达是不同的，此外β-人微管蛋白的框架所编码的蛋白质的羧基末端和氨基末端的氨基酸取代物是可以扩散。而且β-人微管蛋白还在不同细胞和组织中有调节作用。

微管除了是纤毛、鞭毛等运动器官的组成部分，还是中心粒的组成部分。另外，微管在神经细胞内物质运输中起到了重要的作用。许多的轴突营养物质，如小泡、蛋白质颗粒、肌动蛋白、包涵素、钙调蛋白和其他代谢酶类等都是通过微管运输的。

除此以外，在细胞分裂时，染色体在赤道板上的排列以及向两极的运动的动力也来源于微管蛋白的不断的聚合以及解聚。

本发明的多肽的表达谱与β-人微管蛋白在蛋白水平上有93％的同一性及93％的相似性且两者均含有β-人微管蛋白家族的特征性结构域。基于以上各点，故认为本发明的蛋白为β-人微管蛋白，命名为β-人微管蛋白-11.44。并以此推断其与β-人微管蛋白相似，同为β-人微管蛋白家族的成员，并具有相似的生物学功能。在体内有着各种重要的作用，调节着细胞形态的改变和维持、细胞内物质运输、内吞外排、免疫行为、细胞分裂，尤其在神经细胞物质运输、细胞分裂增殖等方面具有重要意义，其表达异常对胚胎发育、细胞分裂增殖、神经细胞功能将产生不良影响，并产生相关的疾病。

由于如上所述β-人微管蛋白-11.44蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的β-人微管蛋白-11.44蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新β-人微管蛋白-11.44蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——β-人微管蛋白-11.44以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码β-人微管蛋白-11.44的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码β-人微管蛋白-11.44的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产β-人微管蛋白-11.44的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——β-人微管蛋白-11.44的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——β-人微管蛋白-11.44的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与β-人微管蛋白-11.44异常相关的疾病的方法。