[发明专利]一种多肽——壳三糖酶－52.03和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——壳三糖酶-52.03，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

本发明公开了一种新的多肽——壳三糖酶-52.03，编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于诊治多种疾病的方法，如大叶性肺炎，中耳炎，乳突炎，脊髓灰质炎病毒，肿瘤，超敏反应等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其诊治作用。本发明还公开了编码这种新的壳三糖酶-52.03的多核苷酸的用途。

壳三糖酶是糖基化水解酶家族的成员，壳三糖酶基因位于染色体1q31-q32位点。此基因含有20个外显子，它的长度为20kb。激活后的壳三糖酶基因的外显子3′端接合位点会产生24base的复制子，并能产生一个87核苷酸的阅读框。

壳三糖酶由活化的巨噬细胞所合成，在Gaucher疾病的病人的血液和组织中壳三糖酶的活性被显著提高，这是由于病人的脂质性巨噬细胞的扩增而大量产生和分泌引起的。壳三糖酶能使壳质降解，它也被认为是几丁质酶同源体。植物中的几丁质酶同源体被确认有抗真菌的作用，而噬菌细胞中壳三糖酶也调节控制着含有角质的病原体的降解。几丁质酶家族的其它成员包括：oviductin(人输卵管特殊的糖蛋白酶)，人软管糖蛋白39(HCgp-39)，以及YKL39。壳三糖酶的主要结构为50kDa分子量的物质和5.0-7.2异类pI。二级结构包含39kDa分子量的物质和不连续的8.1的pI。培养的巨噬细胞显示了新陈代谢过程中50-kDa壳三糖酶首先开始合成并在转译后矫正。首先，蛋白质羧基末端的O-的糖基化在电荷上产生不同成分。第二，50-kDa的酶是分泌产生的，它在细胞中羧基末端水解成39-kDa的行式并在细胞中的溶酶体中堆积。遗传性的壳三糖酶活性不足经常出现，在新西兰每20个人中就有一个人壳三糖酶触活性不足，包括在血浆，尿液，培养的巨噬细胞，白细胞球和组织中出现壳三糖酶触活性不足的情况。该壳三糖酶的作用异常将影响生物体对含有角质的病原体的降解，进而影响体内免疫反应，即引发一系列与之相关的免疫紊乱性疾病。

本发明的人的该酶与壳三糖酶在蛋白水平上有的54％相同性和71％的相似性。且两者均含有壳三糖酶家族的特征性结构域。基于以上各点，故认为本发明的蛋白为壳三糖酶，命名为壳三糖酶-52.03。并以此推断其与壳三糖酶相似，同为壳三糖酶家族的成员，并具有相似的生物学功能。其突变或表达异常将导致相关免疫途径的异常，进而引发各种相关的疾病。

由于如上所述壳三糖酶-52.03蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的壳三糖酶-52.03蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新壳三糖酶-52.03蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——壳三糖酶-52.03以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码壳三糖酶-52.03的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码壳三糖酶-52.03的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产壳三糖酶-52.03的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——壳三糖酶-52.03的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——壳三糖酶-52.03的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与壳三糖酶-52.03异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。