[发明专利]一种多肽——热冲击蛋白－10.67和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——热冲击蛋白-10.67，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

无论是真核生物还是原核生物，在受热以及受到其它外部环境的冲击时，都会相应地合成一类叫做热冲击蛋白的蛋白(Hsp蛋白)。Hsp蛋白被认为是与主要的细胞生长过程相关的陪伴蛋白。这些过程包括转录、翻译、DNA合成、蛋白质的折叠与运输以及细胞的分化等。

这类蛋白中平均分子量为90kDa的蛋白组成了一个蛋白家族，通称为Hsp90蛋白。在原核生物中，Hsp90蛋白由624个氨基酸组成，该蛋白的缺失将导致高温情况下的生长减缓。在真核生物细胞中，正常情况下Hsp90蛋白比较充足，在加热、重金属离子等影响蛋白折叠的情况下合成增加。

据报道，Hsp90蛋白与许多蛋白相关，这些蛋白包括酪蛋白激酶II、eIF2α激酶以及细胞骨架蛋白等。在高等生物体内，Hsp90蛋白能够与类固醇受体相互作用，调节雌性激素、肾上腺皮质激素、男性荷尔蒙以及黄体酮，以使类固醇受体在与类固醇结合前处于非折叠的稳定状态。此外，Hsp90蛋白还具有ATP活性并且都能自动磷酸化丝氨酸和苏氨酸残基[Nadeau K.，DasA.，Walsh C.T.(1993)J.Biol.Chem.268：1479-1487]。

所有不同来源的Hsp90蛋白均含有一段如下所示的高度保守的一致性序列片段：

Y-x-[NQH]-K-[DE]-[IVA]-F-L-R-[ED]该片段位于Hsp90蛋白的N-末端区域。

由于如上所述热冲击蛋白-10.67蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的热冲击蛋白-10.67蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新热冲击蛋白-10.67蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——热冲击蛋白-10.67以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码热冲击蛋白-10.67的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码热冲击蛋白-10.67的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产热冲击蛋白-10.67的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——热冲击蛋白-10.67的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——热冲击蛋白-10.67的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与热冲击蛋白-10.67异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1536-1829位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2777位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制热冲击蛋白-10.67蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。

本发明还涉及一种体外检测与热冲击蛋白-10.67蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本发明多肽的量或生物活性。

本发明也涉及一种药物组合物，它含有本发明多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。