[发明专利]积雪草总甙的制备新方法及其新用途

说明书

本发明涉及医药技术领域，是制备积雪草总甙的一种新方法及其治疗抑郁症的新用途。

抑郁症是以显著而持久的情绪低落、行为木僵和悲观厌世为主要特征的一组疾病。实际上它很普通，以至被称为精神疾病中的“普通感冒”，同时它还是严重的、威胁生命的疾病，折磨着世界上数以千万计的人。目前用于治疗抑郁症的药物主要有三环类抗抑郁剂、单胺氧化酶抑制剂和5-羟色胺重吸收抑制剂，但是均有不同程度的副作用，如嗜睡、视物模糊、高血压、惊厥和性欲低下等，从而限制了其广泛使用。

积雪草Centella asiatica(L.)Urban为伞形科植物，我国长江以南广大地区均有分布，其提取物积雪草总甙具有促进伤口愈合、减少疤痕疙瘩生成的作用，效果显著。现在已将积雪草总甙制备成外用药(如积雪霜)和口服药(如积雪片)，但是该药仅限于治疗外伤，迄今为止尚未见将积雪草总甙用于治疗抑郁症的报道，经过实验发现积雪草总甙具有较好的抗抑郁作用，是一种较有发展前途的天然抗抑郁剂。已报道的积雪草总甙的制备方法步骤复杂，使用有机溶剂种类和数量较多，易造成环境污染。

本发明的目的之一在于提供一种工艺简单、得率高、不易造成环境污染的积雪草总甙制备新方法。

本发明另一目的在于对积雪草总甙提供一种治疗抑郁症的新用途。

积雪草总甙的制备方法包括提取、纯化、结晶三步骤。本发明提取和结晶过程与原工艺相同，但纯化过程不同。原纯化工艺采用卤化剂(氯仿、二氯甲烷等)萃取积雪草含水醇提取物，弃卤化剂层，用高级醇(正丁醇、仲丁醇等)萃取水层中积雪草总甙，以氢氧化钠水溶液和水溶液洗涤高级醇层提取物，并将其减压浓缩，其缺点是方法复杂，过程繁琐，使用较多的有机溶剂如卤化剂、高级醇，对环境污染严重，也有害于实际操作者的身体健康(制备方法详见专利CN 1194154A号)。本发明则将积雪草总甙提取液经皂甙吸附型大孔树脂吸附，用蒸馏水洗脱去除杂质后，以含水醇洗脱积雪草总甙，收集洗脱液并减压浓缩至干，得到粘稠状物，再用含水醇溶解后就可用乙酸乙酯加以结晶。此过程步骤简单，有机溶剂使用的种类及数量明显减少，从而既缩短了工艺流程，又减少了对环境的污染和对操作者身体的危害。本发明制备方法具体步骤如下：一、积雪草总甙的提取1、以含水醇浸泡积雪草，得到积雪草总甙提取液；2、冷冻提取液，减压过滤去除沉淀物，得滤液；二、积雪草总甙的纯化1、按常规方法将上述提取液减压浓缩，得到浓缩液；2、减压过滤浓缩液，得到滤液；3、滤液经皂甙吸附型大孔树脂吸附，蒸馏水洗脱去除杂质，再以含醇量5％～95％的甲  醇或乙醇水溶液洗脱，得到洗脱液，详见《中药药理研究方法学》(陈奇主编，人民  卫生出版社出版，1993：70)；4、按常规方法将洗脱液减压浓缩至干，得到粘稠状物；5、用含水醇溶解粘稠状物，比例为：粘稠状物重量(公斤)∶含水醇的体积(毫升)＝1∶1～200，得到积雪草总甙溶液。三、积雪草总甙的结晶1、将上述积雪草总甙溶液以乙酸乙酯结晶，比例为：积雪草总甙溶液的体积(毫升)∶乙酸乙酯的体积(毫升)＝1∶1～200，按常规方法减压浓缩至干，得到粉末状积雪草总甙。

用于本发明的含水醇溶液含醇量为5％～95％的甲醇或乙醇。经¹³C和¹H核磁共振检测，检测结果如表1和表2所示，说明得到的积雪草三萜总皂甙类成分主要由积雪草甙和羟基积雪草甙组成，两种成分占该提取物的60％以上。表1提取物样品中积雪草甙和羟基积雪草甙的¹³C核磁共振化学位移值与标准品比较

                               (溶解于吡啶)碳  积雪草  积雪草甙  羟基积雪  羟基积雪草    碳    积雪草    积雪草甙    羟基积雪   羟基积雪草