[发明专利]一种多肽——人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶－29.7和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种多肽——人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶-29.7，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

UDP糖基转移酶(UGT)是一种酶类的超家族，这种酶催化UTP-糖的糖基集团加成至小的疏水分子，该家族包括以下成员：哺乳动物UDP-葡糖苷酸基转移酶(UDPGT)，此酶缺乏为一种常染色体隐性性状，可致克-钠(Crigler-Najjar)综合征(Dutton G.J.，(In)Glucoronidation of drugs and other compounds，Dutton G.J.，Ed.，pp 1-78，CRC Press，Boca Raton，(1980))，这是一类膜结合微粒体酶类大家族，它催化葡糖醛酸转化成各类外源及内源性亲脂底物，这种酶类在解毒以及而后的去除类似药物及致癌源的异源物质中起重要作用(Burchell B.，Nebert D.W.，Nelson D.R.，Bock K.W.，Iyanagi T.，Jansen P.L.，Lancet D.，Mulder G.J.，Chowdhury J.R.，Siest G.，Tephly T.R.，MackenzieP.I.，DNA Cell Biol.10：487-494(1991))；哺乳动物2-羟酰鞘氨醇-1-beta-半乳糖基转移酶(也被称为UDP-半乳糖神经酰胺半乳糖基转移酶)，该酶催化转移半乳糖至神经酰胺，这是生物合成半乳糖脑苷脂中一步关键的酶促步骤，半乳糖脑苷脂是中枢神经系统以及外周神经系统的髓磷脂膜的丰富的鞘脂(Schulte S.，Stoffel W.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90：10265-10269(1993))。该家族成员都有一个位于C-端部分，约为50个氨基酸残基的保守域：[FW]-x(2)-Q-x(2)-[LIVMYA]-[LIMV]-x(4，6)-[LVGAC]-[LVFYA]-[LIVMF]-[STAGCM]-[HNQ]-[STAGC]-G-x(2)-[STAG]-x(3)-[STAGL]-[LIVMFA]-x(4)-[PQR]-[LIVMT]-x(3)-[PA]-x(3)-[DES]-[QEHN]。

1991年Joseph K.Ritter，James M.Crawford等人分离并鉴定了2种人肝脏UDP糖基转移酶的克隆——HUG-Br1和HUG-Br2，它们分别编码UDP糖基转移酶，使胆红素IXα葡萄糖醛酸化以形成单共轭体IXαC8和双共轭体IXαC12。HUG-Br1的cDNA长2351bp，编码533个氨基酸组成的蛋白质，而HUG-Br2的cDNA由2368bp组成，编码的蛋白质由534个氨基酸组成，HUG-Br1和HUG-Br2的mRNA均长2.6kb，前者大量存在而后者含量较少。两者的蛋白产物都含有一个典型的膜插入信号肽和一个跨膜结构域，并且其3′或5′端可能具有天冬氨酸连接(即N-连接)的糖基化位点。(J.Biol.Chem.1991，266(2)：1043-1047)

本发明的多肽与已知的人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶在蛋白水平上具有33％的同源性和50％的相似性，并与之具有相似的结构特征，由此认为其是一种人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶，命名为人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶-29.7，并与已知蛋白具有相似的生物学功能，催化葡糖醛酸转化成各类外源及内源性亲脂底物，在解毒以及而后的去除类似药物及致癌源的异源物质中起重要作用。若发生突变或异常表达，会导致相关生物功能失常，从而引起一系列疾病。

由于如上所述人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶-29.7蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶-29.7蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶-29.7蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶-29.7以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人肝脏尿嘧啶二核苷酸糖基转移酶-29.7的多核苷酸的重组载体。