[发明专利]一种多肽——辅助因子－15.84和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——辅助因子-15.84，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

本发明公开了一种新的多肽——辅助因子-15.84，编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于诊治多种疾病的方法，如HIV，肝炎，肿瘤等。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其诊治作用。本发明还公开了编码这种新的辅助因子-15.84的多核苷酸的用途。

人的免疫缺陷病毒(HIV)的Tat蛋白是一种HIV基因表达的强催化子。遗传学和生物化学已经证明一个或几个细胞余因子对Tat的活性有很大作用。Tat能通过增强RNA聚合酶II的最大的亚基的末端羧基结构域的磷酸化程度而增加转录本的延伸，其机制是使RNA聚合酶II的CTD磷酸化。它的这一作用需要与作为Tat特殊辅助因子的初转录本的5′端相互作用，该特殊辅助因子使Tat和含有RNA聚合酶II的SRB发生免疫沉淀反应。

最新分离出一条TIP60基因(Tat交感蛋白，60kDa)，它是一种特殊的激活剂，可通过与Tat-RNA聚合酶全酶复合物的相互作用，而加强它们的组装。Tat介导的反式激活作用选择性需要TIP60。TIP60能和HIV-1，HIV-2以及EIAV的Tat的激活结构域相联系，其它蛋白质也可能作为中介物或通过对TIP60的共价修饰(如：磷酸化)使Tat与TIP60之间易于作用。它对于HIV基因编码的Tat调节蛋白的短暂激活作用很重要，它在生物体内活化转录作用，有效地控制各种基因的转录表达水平，若表达异常会导致转录停止或过度，而引起各种疾病。在生物体内与各种免疫系统疾病等密切相关。

本发明的人的基因属于调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子家族，在蛋白水平上与调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子有96％的相同性及96％的相似性。基于以上各点，故认为本发明的蛋白为调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子，命名为辅助因子-15.84。并以此推断其与调节蛋白HIV-1 Tat相互作用的辅助因子相似，并具有相似的生物学功能。它在生物体内活化转录作用，有效地控制各种基因的转录表达水平，若表达异常会导致转录停止或过度，而引起各种疾病。在生物体内与各种免疫系统疾病等密切相关。

由于如上所述辅助因子-15.84蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的辅助因子-15.84蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新辅助因子-15.84蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——辅助因子-15.84以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码辅助因子-15.84的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码辅助因子-15.84的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产辅助因子-15.84的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——辅助因子-15.84的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——辅助因子-15.84的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与辅助因子-15.84异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少97％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1629-2063位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2522位的序列。