[发明专利]一种多肽——人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白－13.2和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

位点特异的重组酶在原核生物DNA重组过程中起重要的调节作用。DNA重组是遗传物质重组、进化的重要步骤。人们已克隆得到两种不同类型的重组酶：一种在DNA片段的逆转重组过程中起调节作用；另一种在DNA片段切除及重组过程中起调节作用。DNA位点特异的重组只需单链的转换，而不需DNA的合成或高能量协同因子的共同参与。

目前，人们已得到并研究了两种无相关性的重组酶家族，一种为周期整合重组酶家族，该家族的成员多为细菌、酵母质粒酶等。另一种为溶解酶家族，该酶家族的成员均含有高度保守的结构特征，其N末端为催化活性及二聚作用结构域，含有高度保守的丝氨酸残基，参与DNA的结合及作用；而其C末端为保守的螺旋-转角-螺旋DNA结合结构域。该蛋白家族的成员在生物体内参与多种重要的DNA重组过程。

进一步的研究发现，溶解酶家族的成员均由180至200个氨基酸残基组成。且该蛋白家族成员的蛋白序列中均含有两个高度保守的特征性序列片段，第一个保守的序列片段为蛋白N末端区域，其中含有一保守的丝氨酸残基，参与蛋白与DNA的共价结合；第二个保守的特征性序列片段约在丝氨酸活性作用位点的上游50个氨基酸残基位点。该两个保守的特征性序列片段如下所示：序列片段1：Y-[LIVAC]-R-[VA]-S-[ST]-X(2)-Q；序列片段2：G-[DE]-X(2)-[LIVM]-X(3)-[LIVM]-[DT]-R-[LIVM]-[GSA]；其中，序列片段1中的S即为丝氨酸活性中心位点。该两个序列片段的突变或表达异常将直接蛋白在体内的作用异常，进而影响相关的DNA遗传物质在体内的重组及表达。

由于如上所述人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人含位点特异的重组酶特征性序列片段的蛋白-13.2异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中1016-1378位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-2825位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。