[发明专利]载脂蛋白B－100表位的模拟肽、其多联体和修饰肽,以及含有这些肽的疫苗组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种治疗肥胖的疫苗组合物。更具体地说，本发明涉及一种包含载脂蛋白B-100的模拟肽表位、其多联体和修饰肽的疫苗组合物。

背景技术

血清脂质由胆固醇、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸、磷脂等组成，其在血流中以脂质与载脂蛋白的复合物—脂蛋白形式存在。

在这些脂蛋白中，低密度脂蛋白(LDL)是TG和胆固醇的主要载体。由于饮食生活或其它因素的变化，由血液中LDL-胆固醇水平升高引起的动脉硬化、冠状动脉疾病或心肌梗塞的患者数量已有显著增加。

因此，现已进行各种研究来降低LDL-胆固醇的水平和显示上述疾病的病因，以治疗患有上述疾病的患者。

LDL-胆固醇是与脂质有关的成年疾病的主要病因，它可由巨噬细胞转变成高密度脂蛋白(HDL)的形式。另外，在肝脏中，LDL-胆固醇也可转变成其它物质或转变成胆汁酸形式(Brown，M.S.和Goldstein，J.L.，1983，Annu.Rev.Biochem.，52：223-261)。

载脂蛋白B-100是LDL中的主要蛋白部分，它也存在于非常低密度的脂蛋白(VLDL)和乳麇微粒中。当血液中通过识别载脂蛋白B-100诱导产生抗体时，血中的LDL-胆固醇可通过巨噬细胞的吞噬作用来除去，因为载脂蛋白B-100介导LDL颗粒与显露在细胞表面上的LDL-受体结合(Dalum I.，等人.，1997，Mol.Immunol.，34(16-17)：1113-20)。

当诸如抗体等大分子已经和LDL表面上的载脂蛋白B-100结合时，由于与载脂蛋白B-100结合的大分子引起的空间位阻，诸如脂蛋白脂肪酶等脂肪酶不能水解TG等。因此，可利用结合载脂蛋白B-100的抗体来抑制肥胖的主要因素—游离脂肪酸的形成。

最近，已经在诸如小鼠和家兔等各种动物模型中进行了几个用疫苗来降低LDL-胆固醇水平和抑制动脉硬化发生的研究。例如，C.R.Alving报道说，胆固醇可通过代谢或氧化来修饰，经修饰的胆固醇在某些情况下是强的抗原决定簇(Alving，C.R.，等人，1989，Biochem.Soc.Trans.，17(4)：637-9；Alving，C.R.，等人，1996，J.Lab.Clin.Med.，127：40-49；Alving，C.R.，等人，1996，Curr.Top.Microbiol.Immunol.，210：181-6)。

另外，已经报道血清中存在胆固醇的内源性抗体(Wu，J.T.，L.L.，1997，Clin.Lab.Med.，17(3)：595-604，综述)。还有报道说，通过喂食含胆固醇的食物在家兔体内诱导动脉硬化和高胆固醇血症的实验中，通过注射含胆固醇的脂质体而免疫的家兔体内的高胆固醇血症和动脉硬化与对照组相比受到遏制或显著降低。

胆固醇疫苗诱导的这些抗体是结合VLDL、中密度脂蛋白(IDL)和LDL的免疫球蛋白M(IgM)。根据上述内容，据信可以用疫苗来治疗或预防高水平胆固醇引起的高脂血症或动脉硬化(Bailey，J.M.，1994，Science，264：1067-1068；Palinski，W.等人，1995，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，92(3)：821-5；Wu，R.et al，1999，Hypertension，33(1)：53-9)。

本发明者已经发现载脂蛋白B-100的模拟肽表位可有效预防肥胖，基于上述发现，本发明者开发出了用来治疗肥胖的疫苗组合物。

发明揭示

因此，本发明的目的是提供载脂蛋白B-100表位的模拟肽，其多联体和修饰肽。

本发明的另一目的是提供一种制备上述载脂蛋白B-100表位的模拟肽及其多联体和修饰肽的方法。

本发明还有一个目的是提供一种治疗或预防肥胖的药物组合物，该组合物含有上述载脂蛋白B-100表位的模拟肽及其多联体和修饰肽。

本发明的目的可通过提供载脂蛋白B-100表位的模拟肽及其多联体和修饰肽来实现。

为了筛选单克隆抗体(MabB23)结合的人载脂蛋白B-100的表位，在本发明中采用噬菌体的肽文库系统。上述筛选出的肽是在结构上与可被抗体识别的抗原决定簇相似的模拟肽，这些模拟肽可根据所筛选的肽的氨基酸序列来合成。