[发明专利]溶菌复合物及其生产方法和实现该方法所用的菌株

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术，医药和兽医领域，特别涉及一种溶菌复合物，可以用于生产药品和兽药。

背景技术

溶菌制备物在治疗由致病微生物区系包括具抗生素抗性的致病微生物区系导致的多种疾病中的药物的应用是众所周知的。

具有溶菌作用的溶菌酶的制备是已知的(Egorov N.S.Bases of the doctrine ofantibiotics，1979，“Vysshaya shkola”，p.347-349)。卵清蛋白中的溶菌酶具有专效灭窄谱微生物的活性，主要是微球菌。溶菌酶是一种胞壁质酶，对微生物细胞壁的肽聚糖具有特别的作用，也就是，使胞壁酸和葡糖胺之间的键溶解，并在还原端形成胞壁酸片断。

这就是为什么溶菌酶是只专效溶解窄谱的革兰氏阳性微生物。特别是，不能溶解葡萄球菌-革兰氏阳性致病菌的细胞壁，它们的细胞壁要通过五甘氨酸间肽桥(pentaglycine interpeptide bridge)来区分，五肽桥的存在给细胞壁增添了硬度。此外，像大多数酶制备物一样，溶菌酶不够稳定。植物或细菌来源的溶菌酶也涉及到上述所有考虑。

已知一种在溶菌的酶-溶葡萄球菌素的基础上的酶的制备(Schindler C.A.，Schuchardt V.T.Lysostaphin：a new bacteriolytic agent for the Staphylococcus.1964，Proc.of the Nation，Acad.Sci.USA，v.51，N3，pp.415-421)。

然而，该酶不稳定仅在实验室应用。

已知一种溶解细菌的酶的复合物，可以溶解革兰氏阳性微生物，特别是溶解致病的具抗生素抗性的葡萄球菌和其他微生物，并从细菌Xanthomonascampestris VKPM B-4102(俄罗斯专利1549227，Int.class C12N 9/00，1984)的培养液中获得。

从细菌Xanthomonas campestris的培养液获得的溶菌的酶复合物是2种药物的基础：用于医用的命名为溶酰胺酶(lysoamidase)和用于兽药的-lysomast.

该药物由三种溶菌的酶组成：胞壁质酶，胞壁酰丙氨酸脒基酶(muramoylalaninemidase)，内肽酶，多糖高聚物，蛋白酶和稳定组份(O.A.Stepnaya，L.A.Ledova，I.S.Kulaev，Bacteriolytic enzymes，in：“Uspekhibiologicheskoy khimii”，v.XXXIX，Department of scientific and technicalinformation，Pushchino Research Center of Russian Academy of Sciences，Pushchino，1999，p.341-346)。

复合物中组分的比率由作者确定，为(重量百分比％)：

溶菌的酶(胞壁质酶，胞壁酰丙氨酸脒基酶(muramoylalaninemidase)，内肽酶)-  1.0-2.0

蛋白酶-0.5-1.0

稳定组份-4.0-8.0

多糖-  剩余

三种溶菌的酶对微生物的细胞壁的肽聚糖具有不同的底物特异性：(a)胞壁质酶在底物特异性上是溶菌酶的类似物，(b)胞壁酰丙氨酸脒基酶(muramoylalaninemidase)将肽聚糖的肽部分从多糖中切除，以及(c)内肽酶破坏细胞壁的肽桥内部的键。基于上述原因，药物活跃溶解广谱革兰氏阳性微生物细胞，包括致病性链球菌和葡萄球菌。

由于现有的蛋白酶和两种溶菌的酶溶酰胺酶-内肽酶和胞壁酰丙氨酸脒基酶(muramoylalaninemidase)也具有蛋白水解活性，该药物在用于坏死机体的伤口清洗上有好的效果。