[发明专利]物质的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及检测特定物质的方法、检测特定物质的试剂以及检测特定物质的仪器。

背景技术

近年来，人和动物、植物、菌类以及微生物等的基因信息被解读，新的基因一个接一个地被发现。然而新基因编码的蛋白质的功能大部分还没有被阐明，在这些功能被确认之前还需要很长时间和大量劳力。有效的蛋白质功能解析方法的开发成了非常迫切的课题。

作为确认蛋白质功能的方法，是从探索与蛋白质有亲和性的物质开始，然后利用生物，从基因上控制该蛋白质的表达，对蛋白质的作用进行推测而进行的，但重要的是待检测蛋白质和物质的亲和性。这样的方法有将纯化的蛋白质固定于载体上，装到柱子中，使推测与该蛋白质有不同亲和性的物质通过柱子，对它们通过还是吸附于柱子上进行检测的方法。

近年来作为这样有效的方法开发了固定蛋白质的芯片[BioEssays，21，781(1999)]。该芯片使用半导体技术，使特定的蛋白质结合于芯片上的特定部位，然后通过使样品接触该芯片，使物质结合蛋白质，通过标记检测该结合的方法，使用半导体芯片，往往需要微细加工，另外要想检测固定于芯片上的蛋白质是通过什么彼此结合时是不可能的，另外一旦做成芯片，要想很容易地追加其它种类的蛋白质也是不可能的，就需要再制造芯片。

另外芯片目前正被用于检查基因的变异、疾病诊断、药物的效果以及副作用的抑制。然而由于基因的变异是多种多样的，需要准备多种DNA序列，检测各自杂交的DNA。使用DNA芯片的目的是解决这些问题，但存在着与上述相同的问题。

另外至于微珠阵列(ビ一ズアレイ)已知有如下的方法，即使2～3种荧光色素以不同的比例浸渍数μm大小的微珠(ビ一ズ)，该浸渍微珠发出的荧光用2个波长进行解析，将两个波长的荧光强度的比作为各个微珠的判别装置，对应蛋白质、DNA序列等待检测物质在结合或杂交后在微小的空穴捕获颗粒之后，通过荧光强度进行解析的方法[美国专利第5843767号，Analytical Chemistry，70(7)，1242(1998)]等。然而由于该方法使用开有微小空穴的特殊装置，在测定中需要很高的技术，由于通过双波长的荧光强度比的微妙差别进行识别，所以存在着判别能力低，不能适应于各种各样的蛋白质或数万种之多的DNA，以及在微小检测用微孔纳入颗粒时，存在着来自检测样品的灰尘或周边环境掉下的灰尘等混入时成为噪音等问题。就这些方法来说，还存在着借助什么装置或不借助装置蛋白质之间具有的亲和性也不能直接进行检测的缺点。

因此期待着廉价且通用性高的特定物质的检测方法的开发。

发明的公开

本发明的目的在于提供廉价且通用性高的检测特定物质的方法、检测特定物质的试剂以及检测特定物质的仪器。

本发明人发现在微小载体上加上从外部可读取的信号A，准备多种可与载体结合的具有与蛋白质或DNA等待检测物质结合能力的物质(以下称之为结合子)，使它们与载体混合，与检测样品中的物质结合，使新的信号B形成，通过比较简单的装置可大致同时检测信号A和信号B，通过对比进行解析，即使不使用蛋白质或DNA芯片等价格高的装置，也可以检测各种蛋白质和DNA序列等待检测特定物质，使得本发明完成。

就是说，根据本发明方法，通过带有信号A的载体和检测装置，即便没有高度的蛋白质或DNA芯片技术也可以通过使具有与待检测物质结合能力的物质结合于载体，获得与蛋白质或DNA芯片同样的结果。本发明的特征是即使在对很多完全不同的物质进行同样检测的情况下，准备多个带有相当于该物质种类的信号的载体简单，而且信号和序列组合可以由实验者自由地决定。而使用蛋白质或DNA芯片时，当检测样品的种类等改变时，必须要改变蛋白质或DNA芯片，要重新制造，所以无通用性，而本发明的载体可以利用以往方法使所希望的蛋白质或DNA等物质结合于蛋白质或DNA等物质不能结合的载体上来制作，廉价而且简单地对应于很多种物质。

本发明涉及到以下(1)～(36)项。

(1)样品中待检测物质的检测方法，其特征为：作为悬浮于溶液且贯流于在可检测信号A和信号B的信号检测装置中形成的信号检测用中空管时，相对于中空管的横断面具有不重复移动形状的载体，借助或不借助间隔臂与对待检测物质有结合能力的物质(以下省略为结合子)结合的带有可识别信号A的载体与含有待检测物质的样品在溶液中混合，使待检测物质与该结合子结合，通过该结合使信号B在载体上形成后，通过与该中空管连通的溶液供应装置使该载体悬浮液在该中空管中贯流，利用该信号检测装置检测信号A和信号B，将信号A和信号B联系起来。