[发明专利]脂质成分的测定方法和肾病的检查方法

说明书

技术领域

本发明涉及尿中脂质成分的测定方法和测定用试剂。本发明还涉及利用该测定方法的肾病检查手段。

背景技术

尿沉渣中含有的成分有来自肾的成分，从尿路混入的成分，以及在尿中析出的结晶成分等多种。检查沉渣的种类、量，在鉴别肾·尿路疾病和得知其程度上非常重要。这些通过常规染色法的镜检进行。另外，通过检查尿中巨噬细胞的表面抗原可诊断IgA肾病的病态(临床检查、42卷、588～590、1998)，通过尿沉渣脂肪染色进行尿中脂肪球和卵圆形脂肪体(以下，简称为脂肪体)的鉴别，可进行肾病的检查(检查和技术，26卷，441-446，1998)。

另外，在尿中出现的大型巨噬细胞是白血球的表面抗原CD14为阴性、25F9为阳性，与通常的巨噬细胞CD14阳性、25F9阴性有很大差异，而且，已知脂肪球、卵圆形脂肪体属于大型巨噬细胞，测定其作为肾病的检查是有用的(临床病理、47卷、总会号73、1999)。

但是，这些测定中的任一种都是利用染色的镜检、使用单克隆抗体的荧光标识免疫染色的镜检或流式细胞测量法等进行的。这些方法，由于通过对每个检体进行镜检或流式细胞测量法等进行检查，因此操作烦杂，且对多个检体的测定是困难的。

发明的公开

本发明的目的是提供简便的肾病的检查手段。为解决上述课题，本发明者们进行了深入研究，结果发现，测定的尿中脂质成分的量明显暗示与肾病的关联性。

另外，由于尿中的脂质成分与血清中含有的脂质成分的量相比是微量的，因此需要敏感度好的脂质成分的测定方法。本发明者们进一步进行研究的结果是，着眼于与肾病相关的尿中脂肪球和卵圆形脂肪含有的脂肪颗粒，发现通过使用表面活性剂对其进行可溶化，可对其中含有的脂质成分进行测定，并完成了本发明的测定尿中含有的脂质成分的方法。另外，关于本发明中的“可溶化”的意思如后所述。

即，本发明是

1.肾病的检查手段，其特征在于测定尿中含有的脂质成分。

2.前述1中记载的肾病的检查手段，其特征在于，通过使用与脂质成分作用的酶测定前述尿中含有的脂质成分。

3.前述2中记载的肾病的检查手段，其特征在于，前述与脂质成分作用的酶是1种或2种以上选自催化分解反应、脱氢反应、或氧化反应的酶。

4.前述1～3任一项中记载的肾病的检查手段，其特征在于，前述脂质成分是尿中的脂肪滴、脂肪体或脂肪球的至少任意之1或2以上中含有的脂质成分。

5.前述1～4任一项中记载的肾病的检查手段，其特征在于，前述脂质成分是1种或2种以上选自中性脂肪及其衍生物、磷脂及其衍生物、过氧化脂质、固醇类、脂肪酸、脂肪酸盐、脂肪酸酯、脂肪醇、脂肪醛、糖脂、鞘脂、前列腺素、类胡萝卜素的脂质成分。

6.尿中含有的脂质成分的测定方法，其特征在于使用使尿中的不溶性脂肪可溶化或分散达到均质的手段。

7.前述6中记载的测定方法，其特征在于，使前述尿中的不溶性脂肪可溶化或分散达到均质的手段是使用表面活性剂。

8.前述6或7中记载的测定方法，其特征在于，前述尿中含有的脂质成分是脂肪滴、脂肪体或脂肪球的至少任意之1或2以上中含有的脂质成分。

9.前述6～8任一项中记载的测定方法，其特征在于，前述脂质成分是1种或2种以上选自中性脂肪及其衍生物、磷脂及其衍生物、过氧化脂质、固醇类、脂肪酸、脂肪酸盐、脂肪酸酯、脂肪醇、脂肪醛、糖脂、鞘脂、前列腺素、类胡萝卜素的脂质成分。

10.前述6～9任一项中记载的测定方法，其特征在于，前述脂质成分至少是固醇类或磷脂中的任一种。

11.前述6～10任一项中记载的测定方法，其特征在于，前述表面活性剂是具有可溶化脂肪滴、脂肪体或脂肪球中至少任意之1或2以上作用的，可使脂肪滴、脂肪体或脂肪球任一中含有的脂质成分可溶化·分散·游离成为均质的物质。

12.前述6～11任一项中记载的测定方法，其特征在于，前述表面活性剂是非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂、两性离子表面活性剂、或配糖体。

13.前述6～12任一项中记载的测定方法，其特征在于，前述表面活性剂是2种以上并用。

14.前述1中记载的肾病的检查手段，其特征在于是利用前述6～13任一项中记载的方法。

15.权利要求1中记载的肾病的检查手段，其特征在于，是在前述2或3记载的检查手段中，进一步利用前述6～13任一项中记载的方法。