[发明专利]类黄原胶的生物多糖制备方法

说明书

                        技术领域

本发明涉及一种生物多糖的制备方法。

                        背景技术

目前以黄原胶为代表产品的生物多糖，制备过程中是以有机溶剂(乙醇)作为萃取剂或采取酸提取做为主要提取方法而获得，有机溶剂和酸提取剂存在着易挥发、使用时安全系数低且成本高，制成的成品黄原胶价格较高，且产品色泽呈黄色或淡黄色，且采用上述方法制得的该产品的水溶液粘度(800cp)及剪切性能值(6.3)均较差，给实际推广应用带来了很大困难。

                        发明内容

本发明的目的在于提供一种类黄原胶的生物多糖制备方法，该制备方法通过采用中性盐作为提取工艺的主要原料，选用调节等电点等方法作为提取工艺的主要步骤，以达到制备过程操作安全、生产成本低、制得的生物多糖在粘度及剪切性能值等指标上均高于现有产品之目的。

本发明的整体技术构思是：

类黄原胶的生物多糖制备方法，该方法由下列工艺步骤组成：

A、将原始菌种接种到试管中的斜面培养基表面制成斜面菌种；

B、将斜面菌种经扩大培养后制成种子液；

C、将制成的种子液按种子液：培养液为7％-10％的接种量接入发酵罐中的培养液，进行发酵，其中培养液的配方包括下列重量份的组分：

葡萄糖20-30    蔗糖10-20    硝酸钠2.5-4    硫酸镁0.5-1

磷酸二氢钾1.5-2.5    碳酸钙1-1.5    水941-965，

培养液中PH值为7.0-7.2，

发酵的工艺条件为通风量0.2-0.5vvm，搅拌转速120-160转/分钟，培养温度35-40℃，发酵周期为60-70小时；

D、提取

a、将发酵完成后的发酵液调节等电点，调PH值为4.5-5.5，并搅拌均匀；

b、在a步骤中制得的发酵液中加入中性盐进行沉降萃取得到纤维状的生物多糖；

c、将b步骤中制得的生物多糖进行脱水，并用碱式盐调节其PH值为6.5-7.5后干燥、粉碎。

本发明的具体工艺步骤及工艺条件是：

A步骤中斜面培养基由下列重量份的组分组成：

葡萄糖12-15    酵母膏2.5-3    牛肉膏0.5-1    蛋白胨0.5-1琼脂2.5-3    水770-820。

制备斜面菌种的工艺条件是温度36-38℃、培养时间为68-72小时。

B步骤中的扩大培养依次包括摇床种子的制备、一级种子的制备、二级种子的制备，其中摇床种子的制备过程中的培养基的组成成分与A步骤中斜面培养基的组成成分相同，将斜面菌种接入灭菌后的摇床种子的培养基经过培养制成摇床种子，培养的工艺条件为摇床转速120-160转/分钟，培养温度35-40℃，培养时间20-24小时。

一级种子的制备过程中培养液由下列重量份的组分组成：

蔗糖12-15    硝酸钠2.5    酵母膏0.5-1    磷酸二氢钾0.5-1水805＝845。接种量为摇床种子：一级种子培养液＝1％，将摇床种子接入灭菌后的一级种子培养液经过培养制成一级种子，一级种子的制备过程中的工艺条件是PH值为7.0-7.2，通风量0.2-0.3vvm，搅拌转速为200转/分钟，培养温度为35-40℃，培养周期为18-24小时。

二级种子的制备过程中的培养液由下列重量份的组分组成：

葡萄糖12-15    硝酸钠2.5    酵母膏0.5-1    磷酸二氢钾0.5-1水805-845。接种量为一级种子∶二级种子培养基＝7-10％，将一级种子接入灭菌后的二级种子培养液经过培养制成二级种子，二级种子的制备过程中的工艺条件是PH值为7.0-7.2，通风量0.2-0.3vvm，搅拌转速为200转/分钟，培养温度为35-40℃，培养周期为16-20小时。

C步骤中的发酵过程中采用裴林氏法检测还原糖≤0.2％，采用甲醛法检测氨基氮≤0.2％时为发酵终点。

a步骤中调节发酵液的PH值选用乙酸；b步骤中所述的中性盐为NaCl水溶液；c步骤中的脱水设备选用螺旋挤压脱水机，脱水过程中螺旋挤压脱水机的转速为10-15转/分钟，碱式盐为二价碱式盐。二价碱式盐选用氢氧化镁。

原始菌种选自黄单孢菌属(Xanthomonas)中的Vasculorum和Translucens中的一种。

c步骤中干燥温度为65℃，干燥后的成品的水分为13％。