[发明专利]黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2－烷氧基－胡椒基乙醇及其制备方法与应用

说明书

(一)技术领域

本发明涉及黄樟素衍生物及其合成与应用，具体地说涉及黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2-烷氧基-胡椒基乙醇及其合成、分离、纯化方法与应用。

(二)背景技术

黄樟素氧化物结构式为：

分子式：C₁₀H₁₀O₃

分子量：178，性状：浅黄色液体，沸点b.p.118℃/4mmHg，折光率n²⁰1.533。

黄樟素氧化物在40多年前已被合成出来。关于其应用的报道，始见于20世纪70年代，其用途多是将该化合物作为底物用于氧化物水解酶的光谱分析；20世纪80年代又发现黄樟素(微弱的致癌剂)在动物体内代谢时产生黄樟素氧化物。1995和1996年乔特(Qato)和根斯那(Guenthner)对黄樟素氧化物与DNA的结合性进行了研究〖见《Toxicol Lett》1995，75(1-3)：201-207和《Drug Metab Dispos》1996，24(9)：1020-7〗，发现该化合物在体外能与DNA结合，并通过与DNA中的脱氧鸟核苷酸结合形成加合物，但在动物体内未检测到黄樟素氧化物与肝脏DNA之间该加合物的形成，进一步的研究证明黄樟素氧化物与DNA的结合为共价结合，除主要与鸟核苷酸结合外，它也能与DNA的其它3种碱基结合，其机制与黄樟素氧化物含有具生理活性的甲撑二氧苯基与环氧结构有关。但是，上述诸项对黄樟素氧化物研究报道，只是对黄樟素氧化物本身的毒性、药理作用、与DNA的结合情况进行了研究，而有关进行黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2-烷氧基-胡椒基乙醇的合成、分离、纯化，以及利用其在血管内皮细胞生长及凋亡过程中进行药理学的研究与应用，经权威机构检索查新，目前国内外尚未见报道。

(三)发明内容

本发明的目的在于提供一种黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2-烷氧基-胡椒基乙醇及其合成、分离、纯化方法与其在诱导血管内皮细胞凋亡中的应用。

本发明的黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2-烷氧基-胡椒基乙醇用下述通式(I)表示：其中：R代表C_1-5烷基。

上文所述的烷基是指具有1～5个碳原子的直链或支链的烷基。例如：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基等。优选具有1～3个碳原子的直链或支链的烷基，特别优选甲基、乙基，最优选甲基。

本发明的黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2-烷氧基-胡椒基乙醇合成、分离、纯化方法，包括如下步骤：

a.烷氧基钠的醇溶液制备

将金属钠以其摩尔数与醇体积比为1∶1000～1∶3500的比例加入到醇中，反应至金属钠全部消失，制得烷氧基钠的醇溶液。

b.黄樟素氧化物与烷氧基钠的亲核开环加成反应

在上述烷氧基钠的醇溶液中，20℃～25℃条件下，以黄樟素氧化物与烷氧基钠的摩尔比为1∶1～1∶5的比例加入黄樟素氧化物，加热回流反应6～40小时。

c.分离纯化

减压蒸出溶剂后，将混合物冷却至20℃～25℃，加入混合物体积量5～10倍的水，再用2～5倍水量的氯仿萃取，重复三次，用无水硫酸镁干燥，过滤后减压浓缩，剩余物用硅胶柱层析分离纯化，得到黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2-烷氧基-胡椒基乙醇。

上述化合物合成过程反应式如下：

其中，步骤a中所述的醇是甲醇或乙醇。

其中，步骤b中所述的回流反应时间是10-24小时。

其中，步骤b中所述的黄樟素氧化物与烷氧基钠的摩尔比为1∶1～1∶2。

其中，步骤c中所述的硅胶柱层析分离使用石油醚/乙酸乙酯为展开剂，其体积比是2∶1～1∶3。

本发明的黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2-烷氧基-胡椒基乙醇在诱导血管内皮细胞凋亡中具有重要作用，具备很大的应用开发前景。

为了更好地理解本发明的实质及本发明化合物的作用效果，下面用黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2-烷氧基-胡椒基乙醇所作的药理实验及结果，来说明其在血管内皮细胞凋亡中的应用。

血管内皮细胞的制备：以常规方法培养血管内皮细胞，选取生长状态良好的、且处于对数生长期的血管内皮细胞备用。

采用细胞生物学和分子生物学的方法，进行如下实验：研究黄樟素氧化物的烷氧基衍生物2-烷氧基-胡椒基乙醇对血管内皮细胞凋亡的影响