[发明专利]用于白血病分型和研究的蛋白质芯片

权利要求书

1，用于白血病分型和研究的蛋白质芯片，其特征在于，将与白血病相关的表达于白细胞细胞膜上的特异性表面标志CD(Cluster ofDifferentiation)系列抗原分子的相应抗体以及阳性对照、阴性对照同时高密度点印于固相载体上，蛋白质通过化学键连接固定在固相载体上。

2，根据权利要求1所述的用于白血病分型和研究的蛋白质芯片，其特征在于，所述表面标志CD系列抗原，可包括已知的CD分子或其中的一部分；所述阳性对照分别采用CD4和CD8；所述阴性对照采用人血清白蛋白(Human Serum Albumin，HSA)。

3，用于白血病分型和研究的蛋白质芯片的使用方法，其特征在于，采用双抗体夹心法，即是取病人外周血，稀释后滴加于芯片表面，表达分泌不同CD抗原分子的细胞分别被固定在芯片上的相对应的抗体捕获，洗去未结合的其他物质后，加入荧光标记的CD4抗体和CD8抗体的混合液，由于CD4和CD8是正常白细胞和病态白细胞普遍表达的表面标志，洗去未结合的抗体后，进行荧光扫描、分析。

4，根据权利要求3所述的用于白血病分型和研究的蛋白质芯片的使用方法，其特征在于，对荧光扫描的结果分析如下：某点产生荧光信号，则表明该病人的白细胞可分泌表达该点所对应的CD分子，记为阳性；如果不产生荧光信号，则记为阴性。

5，用于白血病分型和研究的蛋白质芯片的用途，其特征在于，用于对病人进行白血病分型，或研究不同型白血病的CD表达特征。

6，用于白血病分型和研究的蛋白质芯片的制备方法，其特征在于，第一步，根据样品数目选择合适的多样品微阵列生物芯片，确定每个样品对应的检测CD分子的腔室，做好标记，并确定点阵的排列方式和点样位置；第二步，点样针从多孔板取出包括各种CD抗体以及对照品的蛋白质样品后直接高密度点印于固态基底上；第三步，室温过夜或37℃温育1小时，以固定样品；第四步，利用制作蛋白芯片的常规方法封闭、洗涤、干燥、包装和保存。

7，用于白血病分型和研究的蛋白质芯片的检测方法，其特征在于，进行杂交反应：第一步，在点样好的芯片上滴加患者白细胞稀释液样品，37℃温育1小时，使抗原抗体充分反应；第二步，用低浓度钠离子盐为主的洗脱液洗去多余样品，室温晾干；第三步，加封阻液封阻并再次洗净晾干；第四步，滴加以封阻液稀释过的荧光标记的CD4和CD8的抗体混合液，37℃避光温育30分钟，洗净并室温晾干；第五步，反应结束后，利用专业的芯片扫描分析仪进行结果的判读和分析。