[发明专利]一种新的人类蛋白编码序列、其制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种人类细胞分化和发育蛋白序列。更具体地说，本发明涉及一种Wolf-Hirschhorn综合症相关人类蛋白(hWHSRP)的cDNA序列以及该序列编码的多肽。本发明还涉及所述多核苷酸序列和所述多肽的生产方法，以及这些多核苷酸和所述多肽的用途。

背景技术

Wolf-Hirschhorn综合症(WHS)又被称为4号染色体短臂缺失综合症，顾名思义，它是由第四号染色体短臂的部分缺失引起的。该病患者通常表现出严重的生长延滞和智力缺陷。据浙江省20个医疗单位对1979年各医院产房的登记统计表明，即使足月生产，新生儿出生体重仅约两千克左右，活动性较少，肌张力较弱，神经运动及生长发育严重障碍：唇腭裂的几率为10％，小颌的几率50％为，先天性心脏病的几率为50％，癫痫的几率为50％。

研究表明，该病对于发育另一严重的影响是其关键部位，即WHS病人交叠的最小区域，定位于慢性舞蹈病G8(D4S10)标记远端。慢性舞蹈症(chronic progressivechorea)又名为遗传性舞蹈病(hereditary chorea)或Huntington舞蹈病，是基底节及大脑皮层变性导致的一种遗传病。其特征为慢性进行性舞蹈样动作和痴呆，个别患者伴有癫痫、肌阵挛、共济失调及头疼等症状。

在研究WHS的过程中，其关键部位被限定在一个165kb的序列已知区域。Stec I等人在该关键部位鉴定了一个长度为90kb的基因，并定名为WHSC1(Wolf-Hirschhornsyndrome candidate 1)。这个含有25个外显子的基因，在早期发育和复杂的剪切和分化过程中广泛表达。它在快速增长的胚胎组织中优先表达。它编码存在于四个发育蛋白中的功能域：一个PWWP，一个HMG，一个SET和一个PHD型的锌指。根据上述特征，WHSC1被认为是与WHS特征现象相关的候选基因(Hum Mol Genet 1998Jul；7(7)：1071-82)。此外，Stec I还鉴定了一个蛋白结构域并根据其保守的“脯氨酸—色氨酸—色氨酸—脯氨酸”序列将其并命名为PWWP。它在核源的蛋白中存在，并在细胞生长和分化中起重要作用，还涉及蛋白—蛋白相互作用(2000，FEBSLett；473(1)：1-5)。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种细胞分化和发育相关多核苷酸，该多核苷酸编码的蛋白被命名为Wolf-Hirschhorn综合症相关人类蛋白(human Wolf-Hirschhorn syndromerelated protein，hWHSRP)。

本发明的另一个目的是提供一种WHS相关蛋白，该蛋白被命名为hWHSRP。

本发明的再一个目的是提供一种利用重组技术生产所述的hWHSRP的方法。

本发明还提供了hWHSRP基因序列和多肽的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，它包括：编码具有人hWHSRP蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.1中从核苷酸1-921位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.1中从核苷酸1-921位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码一多肽，该多肽具有SEQ ID NO.2所示的序列。更佳地，该序列具有SEQ ID NO.1中从1-921位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离的hWHSRP蛋白多肽，它包括：具有SEQ IDNO.2氨基酸序列的多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQID NO.2序列的多肽。

在本发明的另一方面，提供了一种载体，它含有上述分离出的DNA。

在本发明的另一方面，提供了一种所述载体转化的宿主细胞。

在本发明的另一方面，提供了一种产生具有hWHSRP蛋白活性的多肽的方法，该方法包括：

(a)将编码具有hWHSRP蛋白活性的多肽的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成hWHSRP蛋白表达载体，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.1中从核苷酸1-921位的核苷酸序列有至少70％的同源性；

(b)将步骤(a)中的表达载体转入宿主细胞，形成hWHSRP蛋白的重组细胞；

(c)在适合表达hWHSRP蛋白多肽的条件下，培养步骤(b)中的重组细胞；

(d)分离出具有hWHSRP蛋白活性的多肽。