[发明专利]人腺苷酸环化酶相关蛋白编码序列、其制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种新的人基因核苷酸序列。更具体地说，本发明涉及人腺苷酸环化酶相关蛋白的cDNA序列以及该序列编码的多肽。本发明还涉及所述多核苷酸序列和所述多肽的生产方法，以及这些多核苷酸和所述多肽的用途。

背景技术

生物体无时无刻不与周围环境发生着联系，进行着交流和协调，以保持其与环境以及本身内部的平衡与统一。当生物体受到外界刺激后，会将这种刺激通过细胞中各种信号转导途径传递到一定部位，产生各种生物效应。信号传导调节和控制着许多生命过程，诸如生物体的生长、发育、神经传导、激素和内分泌作用、学习与记忆、疾病、衰老与死亡等等。

cAMP是信号通路中的众多传递者之一，在细胞信号传导中起重要作用。腺苷酸环化酶(Adenylate cyclase)是细胞中cAMP信号通路的催化单位。它结合在质膜上并跨越质膜十二次，是由大约1100个氨基酸残基组成的糖蛋白。该酶含有两个功能域：一个N末端的催化功能结构域和一个C末端的调控结构域。有两个高度保守区域：第一个位于催化结构域中，第二个在调节结构域中，后者含有一个保守的组氨酸，该组氨酸可被PTS系统的IIA酶磷酸化，从而激活整个环化酶。腺苷酸环化酶的作用是在Mg²⁺或Mn²⁺存在下的条件下催化ATP生成3’，5’-环腺苷酸(cAMP)。作为cAMP信号通路的胞内第二信使的cAMP，在细胞内的浓度(正常状况下≤10^-6mol/L)应该被严格的控制，并且能够对细胞外信号产生快速的应答。例如当刺激型激素存在时，cAMP水平在1秒钟内增加5倍以上。细胞内另一种类型的酶即环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)可快速的降解cAMP生成5’-腺苷酸(5-AMP)，使细胞内cAMP水平下降。

cAMP信号通路的最后一个化学反应是通过蛋白激酶A完成的。CAMP特异性的活化蛋白激酶A，活化的蛋白激酶A即可使特殊的蛋白磷酸化。依赖于cAMP的蛋白激酶A将ATP末端的磷酸转移到底物蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基上。许多酶被蛋白激酶A磷酸化后，酶的活性提高；另一些酶被磷酸化后，酶活性降低。

每个蛋白激酶A由两部分组成：两个催化亚基和两个调节亚基。不存在cAMP时，催化亚基和调节亚基形成一个钝化复合物。cAMP与调节亚基结合，改变了调节亚基的构象，使调节亚基和催化亚基解离，催化亚基释放。被释放的蛋白激酶A的催化亚基转为到细胞核中并磷酸化一种称为CREB的蛋白(binding protein of cAMP-responseelement，与cAMP应答元件结合的蛋白)的丝氨酸残基。被磷酸化的CREB作为基因调节蛋白识别靶基因上的基因调节序列CRE(cAMP-response element，cAMP应答元件)并与之结合调节靶基因的表达。通过靶基因表达产物把外界刺激转变为信号逐级传递，进而影响整个生物体的生理活动。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种新的多核苷酸，该多核苷酸编码转运蛋白家族的一个新成员，本发明的蛋白被命名为人腺苷酸环化酶相关蛋白(human adenylate cyclaselike，hACL)。

本发明的另一个目的是提供一种新的转运蛋白家族成员，该蛋白被命名为人hACL。

本发明的再一个目的是提供一种利用重组技术生产所述的人hACL的方法。

本发明还提供了hACL基因序列和多肽的应用。

在本发明的一个方面，提供了一种分离出的DNA分子，它包括：编码具有人hACL蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.1中从核苷酸1040-1519位的核苷酸序列有至少90％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在中度严紧条件下与SEQ ID NO.1中从核苷酸1040-1519位的核苷酸序列杂交。较佳地，所述的序列编码一多肽，该多肽具有SEQ ID NO.2所示的序列。更佳地，该序列具有SEQ ID NO.1中从1040-1519位的核苷酸序列。

在本发明的另一方面，提供了一种分离的hACL蛋白多肽，它包括：具有SEQ ID NO.2氨基酸序列的多肽、或其活性片段，或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ IDNO.2序列的多肽。

在本发明的另一方面，提供了一种载体，它含有上述分离出的DNA。

在本发明的另一方面，提供了一种所述载体转化的宿主细胞。

在本发明的另一方面，提供了一种产生具有hACL蛋白活性的多肽的方法，该方法包括：