[发明专利]一种蛋白质芯片及其制作方法无效
| 申请号： | 02111698.9 | 申请日： | 2002-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN1381723A | 公开（公告）日： | 2002-11-27 |
| 发明（设计）人： | 黄伟达;钱志康;宣宝琴;徐剑锋;王奕然;万凯;丁天;章宏海;史顺成;程小伟;宋海林 | 申请（专利权）人： | 复旦大学;上海恒达科技发展股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/50 | 分类号： | G01N33/50;G01N33/68;G01N33/543 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白质 芯片 及其 制作方法 | ||
1、一种蛋白质芯片，由固体基质和蛋白质结合组成，其特征在于固体基质表面上交联有金属离子螯合物，蛋白质带有组氨酸标记，并通过金属离子介导定位于固体基质上。
2、根据权利要求1所述的蛋白质芯片，其特征在于金属离子螯合物是N端为-NH2，C端为-CH(COOH)N(CH2COOH)2，中间为任何有机基团的化合物。
3、根据权利要求1所述的蛋白质芯片，其特征在于固态体基质选自玻片、塑料、多孔硅、尼龙膜、聚苯乙烯、硝酸纤维膜之一种。
4、根据权利要求1所述的蛋白质芯片，其特征在于金属离子是Ni2+、Cu2+、Fe3+之一种。
5、根据权利要求1所述的蛋白质芯片，其特征在于蛋白质的组氨酸标记可以是在蛋白质的N端或C端。
6、一种如权利要求1所述的蛋白质芯片的制作方法，其特征在于以简便的方式将带有组氨酸标记的蛋白质定向固定于芯片表面，具体步骤如下：(1)将经清洗的固体基质进行醛基化或羧基化预处理，使其表面形成活性基团；(2)将经活化的基质浸于5mM-50mM的金属离子螯合物溶液中5-30分钟，室温孵育0.5-2小时；(3)将此基质浸于5mM-0.1M金属离子溶液中5-30分钟；(4)用pH7.5以上的缓冲液平衡10-30分钟；(5)然后把带有组氨酸标记的蛋白质点于其上，置于20℃水浴箱温育30-60分钟。
7、根据权利要求6所述的蛋白质芯片的制作方法，其特征在于蛋白质样品中加有其40-60％重量的甘油。
8、根据权利要求6所述的蛋白质芯片的制作方法，其特征在于pH7.5以上的缓冲液可以是PBS，TBS或Hepes缓冲液。
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