[发明专利]适用于克百威残留分析的直接竞争酶联免疫吸附测定试剂盒

说明书

                           技术领域

本发明涉及一种适用于克百威残留分析的酶联免疫吸附测定试剂盒，主要适用于用该试剂盒快速测定大批量蔬菜、水、土壤、中毒等环境、食品等样品中的克百威残留。

                           背景技术

农药及其代谢物传统的残留分析方法主要是依靠气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)、质谱(MS)等物理化学分析手段，但由于农药使用规模不断扩大，农药残留造成环境影响和人类健康的慢性和长期效应日益受到人们关注和担忧，对农药残留的限制也越来越严格，对分析测定对象、种类、数量、范围、指标等诸方面都提出了新的要求和更高的标准，但传统的理化分析方法通常繁琐复杂，样品前处理过程复杂，工作量大，仪器昂贵，并要求有熟练的技术人员及较长的分析周期。因此人们迫切希望有一种简单，快速，灵敏及廉价的检测技术能在野外和实验室内进行大批量的筛选试验。免疫分析法正具备这些优点，所以尽管免疫分析用于农药残留分析的时间很短，但已很快用于环境样品和食品中农药残留的分析。

克百威(Carbofuran，2，3-二氢-2，2-二甲基-7-苯并呋喃基-N-甲基氨基甲酸酯，商品名呋喃丹)，自1969年由FMC公司和Mobay化学公司开发生产后即作为一种高效和、广谱的杀虫、杀线虫剂，在世界范围内广泛应用于粮食、蔬菜、水果及经济作物的害虫防治。但是由于克百威的毒性大，在酸性土壤中不易降解，极易污染土壤和地下水源。近年来，由于克百威造成的环境生物毒害，屡见不鲜。尤其是在作物和蔬菜上的大量使用，对人体健康造成极大的危害，这已引起人们的关注。因此，开发一种简单快速，适用于农药残留现场监控的痕量分析方法具有重要的现实意义。

检测克百威残留量常规方法有气相色谱法和高效液相色谱法。由于克百威在象其它大多数N-甲基氨基甲酸酯农药一样具热不稳定性，在一般的气谱操作条件下易降解成酚类。虽然这些问题可通过改变操作条件]或将农药衍生化来解决，目前指定的检测N-甲基氨基甲酸酯类农药的较灵敏的方法是用带荧光检测器的HPLC柱后衍生化法(EPA方法531.1)。然而该方法的灵敏度受样品的净化、浓缩、衍生化等步骤的影响很大。再者该方法需要大多数实验室所不具备的复杂的仪器(如荧光检测器)，且过程繁琐，不适合大批量样品的检测与分析。免疫分析为克百威的残留检测提供了一个新的分析检测途径。目前已有克百威免疫分析方法的报道，但要将免疫分析方法运用到实际中，还需要将其研制成试剂盒。

                           发明内容

本发明的目的是提供一种具有高特异性、高灵敏度、高准确度、高精确度、操作方法简单快速，并能用于大批量样品快速检测的直接竞争试剂盒，与间接竞争试剂盒相比，具有耗时少的优点。

它包括盒体、设在盒体内的96孔/40孔酶标板和设在盒体内的试剂，其特征在于，在酶标板的每孔内，由包被液包被能与抗克百威抗体特异性结合反应的包被抗原，并用1.0～3.0％脱脂奶粉进行封闭，盒内试剂包含洗涤液、底物稀释液、克百威标准溶液、辣根过氧化物酶标记抗克百威兔抗体、底物、显色物质和反应终止液。

本发明的优点是能用于水、土壤、蔬菜、中毒样品中克百威残留的检测，样品的前处理过程简单，耗时少，能同时检测大批量的样品，样品检测成本远低于传统的检测方法。试剂盒采用强特异性、高效价的抗体，提高检测的灵敏度、准确度、精密度。试剂盒的保存期超过6个月。本发明简单快速，适用于农药残留现场监控的痕量分析方法具有重要的现实意义。

                           附图说明

附图是克百威标准曲线图。

                         具体实施方式