[发明专利]一种检测多种肝炎的检测型基因芯片

权利要求书

1.一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，其特征在于芯片包括(1)多种检测寡核酸探针和质量控制寡核酸探针，(2)寡核酸探针通过手臂分子以共价键连接在固相基片上形成的探针阵列。

所谓的寡核酸探针是指能与目的基因杂交的多聚核苷酸，长度在几个碱基到几十个碱基；

所谓的检测寡核酸探针是指化学合成的多种肝炎的保守区、与疾病相关的突变区、基因型及亚型的互补的寡聚核苷酸，突变区的探针包括野生型和突变型探针，基因型及亚型决定区的探针包括多种基因型和多种亚型探针；

所谓的手臂分子是指具有双活性基团的长链有机化合物；

所谓的质量控制探针至少包括二种探针，即阳性对照，阴性对照；阴性对照用于检测杂交信号错误或污染，阳性对照用于检测是否正常杂交；

所谓的寡核酸探针固定为寡聚核苷酸的末端有一特定基团，固定在固体基质表面时，与表面修饰的手臂分子的末端基团形成共价键。

2.根据权利要求1所述的一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，其特征在于：每个病毒靶基因选择有2-4个核酸保守区序列，每个突变区、基因型及亚型决定区根据诊断和鉴定需要选择适当数量的探针，其中每个突变区至少要有两个探针，即一个是野生型，一个是突变型。

3.根据权利要求1或2所述的一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，其特征在于：固相基片包括多种方法处理的玻片、硅片、陶瓷片、塑料片、硝酸纤维膜、尼龙膜等。

4.根据权利要求1或2所述的一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，其特征在于：配备有多组针对芯片所需诊断、检测、流行病调查的感染性疾病病毒靶基因的高特异性的扩增引物，其设计原则为每一个引物必须在人肝炎病毒靶基因的高特异性部位，而每对引物扩增产物常常包含一个或多个突变部位。

5.根据权利要求1或2所述的一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，其特征在于：每一特异性引物能够扩增GENEBANK中所有同种病毒的基因片断。

6.根据权利要求1或2所述的一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，其特征在于：固相基片以双活性基团的长链有机化合物进行表面修饰，常用的双活性基团的长链有机化合物试剂有：N，N-二乙氧基氨基丙基三乙氧基硅烷、三羟甲基氨基硅烷(APTES)、戊二醛、多聚赖氨酸，可采用它们中的一种或者它们的二种组合。

7.根据权利要求1或2所述的一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，其特征在于：可引物标记生物素、地高辛、荧光素，或在基因扩增时加入生物素、地高辛、荧光素标记的dUTP；杂交后检测方法分别是使用纳米金标记的地高辛抗体与地高辛充分结合、使用纳米金标记亲合素(streptavidin or avidin)与生物素充分结合、基因芯片扫描仪进行扫描；对于纳米金标记的地高辛抗体和纳米金标记亲合素(streptavidin or avidin)可直接观察或用普通扫描仪进行扫描。

8.权利要求1或2所述的一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，在肝炎病毒检测、诊断、传染病流行性监测，病毒性肝炎的发病原因快速检测，查明感染病毒，肝炎基因突变检测与鉴定中的运用。

9.根据权利要求1或8所述的一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，其特征在于：可用于一种或多种肝炎病毒的检测，包括甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、庚型肝炎、TTV及其它们的组合。

10.根据权利要求1或8所述的一种检测多种肝炎的检测型基因芯片，其特征在于：可用于种或多种肝炎病毒突变的检测，包括甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎、戊型肝炎、庚型肝炎、TTV及其它们的组合。