[发明专利]银杏内酯AB提取工艺

说明书

本发明涉及一种从银杏叶中提取银杏内酯的工艺。

银杏萜内酯是与银杏黄酮共存于银杏叶中的生物活性物质，银杏内酯主要为抗血小板凝聚因子，白果内酯为神经、精神病药物，对老年性痴呆有奇异的疗效。随着研究的深入，药理实验和临床证实，银杏萜内酯中各组分和生物活性越来越引起人们的重视。因此，人们对提取银杏萜内酯方法的研究也越来越深入。但目前国内外的提取方法多是采用萜内酯混合体的分离，这种方法的问题是产品质量不稳定，纯度低，提取率低。

本发明的目的在于：提供一种用层析法分离银杏萜内酯AB，可使产品质量及产量都得到提高，且生产成本低，适合工业化生产。

本发明是这样实现的：它包括浸提、柱纯化、萃取、分离、结晶几步骤：

(1)取银杏叶加入浸提液，加热到30～80℃，浸提30分钟～2小时后过滤，残渣加入浸提液在30～80℃下浸提30分钟～2小时，再过滤，合并浸提液，回收溶剂；

(2)浓缩液加水冷却至60℃以下，静置沉淀8小时，过吸附柱，流出液进行饱和检验，如饱和则停止上样，用水过柱，再用酒精过柱，收集流出液，回收酒精，真空干燥，得粗提物；

(3)将粗提物用溶剂溶解，过氧化铝柱，收集流出液，待柱饱和后需重新换柱；

(4)将收集的流出液真空浓缩至干物率为30％，析出的晶体即为银杏内酯A和银杏内酯B，而银杏内酯C及白果内酯留在母液内，用抽滤器分离晶体，并用乙醇重结晶得银杏内酯AB。

本发明与现有技术相比，具有工艺路线合理，提取率高，产品质量好等优点。其纯度可达95％以上，总得率在0.2％左右(叶提取)和3％左右(GBE提取)。

本发明的实施例：

(1)取10kg DA201树脂，加水浸泡48小时，用分样筛在过微孔膜的自来水冲洗下筛选出20～60目、60～80目的树脂，取20～60目树脂2000g，用蒸馏水反复清洗干净后，加入2mol/L NaOH 10L，浸泡4小时，用蒸馏水洗至近中性，加入4mol/L HCl 10L，浸泡8小时，用蒸馏水洗至近中性，加入80％的乙醇10L，浸泡10小时，用蒸馏水反复清洗至无酒精味，用蒸馏水浸泡待用，装柱，装入树脂中，树脂中间不能有气泡；

(2)取银杏叶1000g加入60％酒精9000ml，在水浴锅内加热到60～70℃，浸提2小时，每10分钟搅拌一次，用纱布过滤，残渣加入60％的酒精7000ml，在60～70℃下浸提2小时，每10分钟搅拌一次，再过滤，合并浸提液，用真空薄膜蒸发器回收酒精；

(3)浓缩液加水至4000ml左右，冷却至60℃以下，静置沉淀8小时，过DA201树脂柱，过柱流速控制在0.5ml/s，每隔2分钟对流出液进行饱和检验，如饱和则停止上样，用蒸馏水过柱，至流出液清亮为止，再用80％酒精2000ml过柱，收集颜色较深的流出液，真空薄膜蒸发器回收酒精，真空干燥箱干燥，真空度为-0.07～0.08MPa，温度为70℃，得粗提物(GBE)；

(4)将粗提物用1000ml 95％乙醇溶解，过酸性氧化铝柱，收集流出液，待柱饱和后需重新换柱；

(5)将收集的流出液真空浓缩至干物率为30％，此时有大量晶体析出，晶体主体成分为银杏内酯A和银杏内酯B，而银杏内酯C及白果内酯留在母液内，用抽滤器分离晶体，并用少量95％乙醇洗晶体，将晶体用95％乙醇重结晶一次，得银杏内酯AB，纯度＞90％，再重结晶一次，银杏内酯AB纯度＞95％。

用80％酒精1000ml过柱，再用2000ml水过柱，流出液废弃，纯化柱即可重复使用。