[发明专利]一种用于检测各种疾病特定指标的抗原抗体芯片无效
申请号: | 02114655.1 | 申请日: | 2002-07-01 |
公开(公告)号: | CN1388377A | 公开(公告)日: | 2003-01-01 |
发明(设计)人: | 王台虎;马秦荣;谭武红;韩广民;冯宇春 | 申请(专利权)人: | 西安联尔生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/543;G01N33/533;G01N33/574 |
代理公司: | 西安新思维专利事务所有限公司 | 代理人: | 商宇科 |
地址: | 710075 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 各种疾病 特定 指标 抗原 抗体 芯片 | ||
所属技术领域:
本发明涉及生物医学领域,具体涉及一种用于检测各种疾病特定指标的抗原抗体芯片。
背景技术:
正确的诊断对于疾病的治疗至关重要。目前已被广泛应用的有放射免疫分析法、酶联免疫分析法、免疫化学发光分析法、免疫荧光分析法等。它们都是通过检测患者体内存在的某种疾病的标志物的含量,即检测相关疾病的指标来判断疾病的有无和严重程度。在医学界被广泛应用的各种疾病的标志物已达数百种,但目前的各种临床检验方法只能进行单个的检验,作出的结果不准确,为得到正确的检验结果需花费很多的人力、物力和财力,且时间漫长,同时需要病人提供大量的血清,对病人的身体非常不利。
发明内容:
本发明的目的是要提供一种用于检测各种疾病特定指标的抗原抗体芯片,克服现有技术存在的只能进行单个的检验,作出的结果不准确,为得到正确的检验结果需花费很多的人力、物力和财力,且时间漫长,同时需要病人提供大量的血清,对病人的身体非常不利的缺陷。
为解决上述问题,本发明的技术方案如下:一种用于检测各种疾病特定指标的抗原抗体芯片,包括外壳1、基材6和基材6上的点阵3,其特殊之处在于,所述外壳1采用空心壳体,外壳1底部设有吸液层8,基材6设置于吸液层8上,外壳1上部设置有与点阵3相对应的点样口2,该点样口2内侧下方设置有凸檐5,所述外壳1底部对应于点样口2设置有透气孔4。
上述基材6可以是玻璃片、硝酸纤维膜、尼龙膜等,所述吸液层8是吸水棉、吸水纸或高分子吸水合成材料。
上述基材6与吸液层8之间设置有反渗膜7,其渗液方向是由基材6向吸液层8渗透,该反渗膜7可避免被检液在渗入吸液层8后再反渗入基材6上的点阵3,影响检测结果。
上述基材6上的点阵3是平方数个,每个点阵3上的点样点数目相等且是平方数个。
上述点阵3上可选取各种疾病特定指标中的一种疾病特定指标。
上述基材6是18mm×18mm×0.5mm的载玻片、18mm×18mm的硝酸纤维膜或尼龙膜,所述基材6上的点阵3是正方形,点阵3面积为10mm×10mm,对应的点样口2是12mm×12mm的正方形。
上述点阵3上点样点的数目为4个~400个。
上述点阵3上点样点直径为0.1mm~1.0mm,相邻点的点样间距为0.25mm~2.5mm,每个点的点样量为2.0nl~300nl,每一种指标重复点样1点~100点。
上述待检测分子点阵3上的蛋白可以是各种疾病特定指标的相关蛋白中的两种或两种以上。
上述检测分子点阵3中的蛋白可以是全菌或病毒蛋白、其中某一个特异性基因或多肽片段蛋白、对应全菌或病毒蛋白的全抗体蛋白、对应某一个特异性基因或多肽片段蛋白的单株抗体蛋白中的一种、两种或两种以上。
制备抗原抗体芯片所需要的材料有:①各种疾病特定指标的相关蛋白,包括幽门螺旋杆菌;呼吸道疾病;性传播疾病;传染生消化道疾病;子宫颈癌预警;乳腺癌预警;免疫不育系列;内分泌系列;急性心肌梗死标志物;优生优育;卫生检验;婚前健康检查;儿童健康检查;一般常规检查如免疫球蛋白检测和肿瘤标志物检测;妇女健康检查所需的各种提取的生物活性物质;②针对上述各种疾病特定指标的相关蛋白来源于鼠、兔、羊、牛、马或其他动物;③点样系统包括点样用仪器、设备及其相关耗材如点样板等;④基材包括特殊玻璃片、硝酸纤维膜、尼龙膜等;⑤用于点样的抗体浓度为0.05μg/ml~5.0mgl。
使用原理是:病人血清滴加于芯片表面,病人血清中的抗体或抗原分别与固定在芯片上的相对应的抗原或抗体结合,洗去未结合的其它物质后,加入荧光标记的二抗,再根据光信号、金属显色灰度或放射线强度的不同和变化,来反映待测样本中各种抗原性物质的含量。
使用程序:
a)每一芯片仅限1人份,在芯片上标记上样品编号;
b)在芯片盒窗口内滴加3滴试剂A,该试剂A是封闭液,必要时用手轻晃芯
片,使膜表面完全浸湿;
c)待试剂A完全渗入后,加待检血清100ul;
d)待待检血清完全渗入后,再滴加6滴试剂B,该试剂B是洗涤液;
e)待试剂B完全渗入后,滴加10滴试剂C,该试剂C是荧光标记的二抗;
f)待试剂C完全渗入后,最后滴加6滴试剂D,该试剂D是洗涤液;
g)反应完毕后1小时内,将芯片放入芯片阅读系统进行阅读分析。
与现有技术相比,本发明的优点:
1、结构简单、操作便利,成本低,可单人一次使用;
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