[发明专利]一种内含DNA的饰品及其制造工艺

权利要求书

1、一种内含DNA的饰品，其特征是饰品上带有全封闭内腔，该内腔中装有溶解或悬浮在储存液中的DNA。

2、根据权利要求1所述的内含DNA的饰品，其特征是所说的全封闭内腔位于一个独立的囊泡内，并且该囊泡镶嵌在饰品内。

3、根据权利要求1或2内含DNA的饰品，其特征是所说的全封闭内腔所在的部位为透明体。

4、根据权利要求3内含DNA的饰品，其特征是所说的储存液中含有有色的颜料。

5、根据权利要求3内含DNA的饰品，其特征是所说的储存液中含有荧光染料。

6、根据权利要求4内含DNA的饰品，其特征是所说的储存液中还含有荧光染料。

7、一种内含DNA的饰品的制造工艺，其特征是：

——抽取人体的静脉血0.5～10ml作血样，备用；

——配制并取用以下的试剂：

a.5％-10％(w/v)EDTA(乙二胺四乙酸二甲盐)；

b.TKM1：10mM PH＝7.6 Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷-盐酸)，

        10mM KCl(氯化钾)，

        10mM MgCl₂(氯化镁)，

        2mM EDTA(乙二胺四乙酸二甲盐)；

c.非离子型表面活性剂Igepal CA-630(sigma公司的产品)；

d.TKM2：10mM PH＝7.6 Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷-盐酸)，

        10mM KCl(氯化钾)，

        10mM MgCl₂(氯化镁)，

        2mM EDTA(乙二胺四乙酸二甲盐)，

        0.4M氯化钠

e.10％-30％(w/v)SDS(十二烷基硫酸钠)

f.6M NaCl溶液

g.无水乙醇

h.70％7醇

i.DNA的储存液：10-30mM Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷-盐酸)，

               1-10mM EDTA(乙二胺四乙酸二甲盐)PH＝8.0

——选用器材：水浴槽、制冰机、离心机；

——工艺过程：

1)从血液中提取DNA；

在存放有0.06mL 5％EDTA的试管中倒入0.5～10ml血样，摇匀后取出其中的部分放入相应的离心管中，并加入0.5～10ml TKM1、0.01～0.25ml Igepal CA-630，再振摇，直到Igepal CA-630全部溶解；然后在4℃的温度下以2200r/min的转速离心分离10分钟，在去掉上清液后，对留下的沉淀用0.5～10ml TKM1清洗，并在4℃的温度下以2200r/min的转速进行离心分离10分钟，再去掉上清液，且往该沉淀中加入0.06～1.6mlTKM2；此后又加10％SDS 0.005～0.1ml，充分摇匀后放入温度为55℃的水浴10分钟，直至沉淀全部溶解；最后在用冰冷却10分钟后，加0.03～0.6ml 6mol/L的NaCl溶液，待蛋白质沉淀时再放入冰浴中冷却10分钟，这时将它移至4℃的温度下、以5000r/min的转速离心分离10分钟，再次取出上清液并再加入两倍体积的100％的乙醇，在室温下摇晃试管，直至DNA析出；这时的DNA是一种固态的小白点，可用玻棒将它转移到一个已用0.2ml 70％乙醇清洗过且放有不少于0.1ml DNA储存液的小离心管中，使它溶解或悬浮在该储存液中，并在4℃的环境中保存备用。

b)把提取的DNA存入饰品；取用一个内带空腔且其表面预留了一个与空腔连通的孔的饰品或囊泡；用70％的酒精不至一次地洗涤饰品或囊泡的空腔，再用DNA储存液洗涤不少于3次；接着往空腔内加满DNA储存液，然后把上述保存备用的DNA用无菌玻棒，并通过饰品上的孔转移到空腔内，再封闭饰品上的孔即可。

8、根据权利要求7所述的内含DNA的饰品的制造工艺，其特征是：

——抽取人体的静脉血3ml作血样，备用；

——配制并取用以下的试剂：

a.5％-10％(w/v)EDTA(乙二胺四乙酸二甲盐)；

b.TKM1：10mM PH＝7.6 Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷-盐酸)，

        10mM KCl(氯化钾)，

        10mM MgCl₂(氯化镁)，

        2mM EDTA(乙二胺四乙酸二甲盐)；

c.非离子型表面活性剂Igepal CA-630(Sigma公司的产品)；

d.TKM2：10mM PH＝7.6 Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷-盐酸)，

        10mM KCl(氯化钾)，

        10mM MgCl₂(氯化镁)，

        2mM EDTA(乙二胺四乙酸二甲盐)，

        0.4M氯化钠

e.10％-30％(w/v)SDS(十二烷基硫酸钠)

f.6M NaCl溶液

g.无水乙醇

h.70％乙醇

i.DNA的储存液：10-30mM Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷-盐酸)，

               1-10mM EDTA(乙二胺四乙酸二甲盐)PH＝8.0

——选用器材：水浴槽、制冰机、离心机；

——工艺过程：

1)从血液中提取DNA；

在存放有0.06mL 5％EDTA的试管中倒入3ml血样，摇匀后取出其中的2ml放入5ml的离心管中，并加入2ml TKM1、0.05ml Igepal CA-630，再振摇，直到Igepal CA-630全部溶解；然后在4℃的温度中以2200r/min的转速离心分离10分钟，在去掉上清液后，对留下的沉淀用2ml TKM1清洗，并在4℃的温度中以2200r/min的转速进行离心分离10分钟，再去掉上清液，且往该沉淀中加入0.32ml TKM2；此后又加10％SDS0.02ml，充分摇匀后放入温度为55℃的水浴10分钟，直至沉淀全部溶解；最后在用冰冷却10分钟后，加0.12ml 6mol/L的NaCl溶液，待蛋白质沉淀时再放入冰浴中冷却10分钟，这时将它移至4℃的温度中、以5000r/min的转速离心分离10分钟，再次取出上清液并再加入两倍体积的100％的乙醇，在室温下摇晃试管，直至DNA析出；这时的DNA是一种固态的小白点，可用玻棒将它转移到一个已用0.2ml 70％乙醇清洗过且放有0.1ml DNA储存液的小离心管中，使它溶解或悬浮在该储存液中，并在4℃的环境中保存备用。

2)把提取的DNA存入饰品；

取用一个内带空腔且其表面预留了一个与空腔连通的孔的饰品；用70％的酒精不至一次地洗涤饰品的空腔，再用DNA储存液洗涤不少于3次；接着往饰品内加满DNA储存液，然后把上述保存备用的DNA用无菌玻棒，并通过饰品上的孔转移到饰品空腔内，再封闭饰品上的孔即可。以使DNA被封闭在饰品中、与外界空气隔绝，并在-20℃～50℃下保存。