[发明专利]海南青牛胆植物总甾酮的医药用途及其制备方法

说明书

本发明涉及海南青牛胆植物总甾酮的医药用途及其制备方法。

海南青牛胆(Tinospora hainanensis H.S.Lo et Z.X.Li.)系防己科(Menispermaceae)青牛胆属(Tinospora)植物，为海南省特有物种，药用其藤茎。民间主要用于治疗筋骨损伤和关节疼痛等症。海南青牛胆植物总甾酮成分是：β-蜕皮甾酮(β-ecdysone)、罗汉松甾酮A(makisterone A)、24-表-罗汉松甾酮A(24-epi-makisterone A)。药理学研究首次发现，海南青牛胆植物总甾酮具有治疗因钙流失和成骨细胞合成受阻等因素造成的骨质疏松症作用。

本发明的目的是提供一种海南青牛胆植物总甾酮的医药用途。

本发明的另一目的是提供一种海南青牛胆植物总甾酮的制备方法。

本发明的目的是这样实现的：

海南青牛胆植物总甾酮主要包含：β-蜕皮甾酮(β-ecdysone)、罗汉松甾酮A(makisterone A)、24-表-罗汉松甾酮A(24-epi-makisterone A)。

结构式：

β-蜕皮甾酮(β-ecdysone)

罗汉松甾酮A(makisterone A)

24-表-罗汉松甾酮A(24-epi-makisterone A)

海南青牛胆植物总甾酮的医药用途是改善因钙流失或成骨细胞合成受阻引起的骨质疏松。

制备方法包括：().海南青牛胆用醇类溶剂提取；(2).提取物经吸附树脂富集；(3).富集后的中间产物再经吸附剂进行纯化。

海南青牛胆植物总甾酮降低钙流失和促骨细胞形成作用，迄今未见报道，尚属首次发现。①.200μg/ml的海南青牛胆植物总甾酮能显著地抑制钙的流失作用；②.200μg/ml的海南青牛胆植物总甾酮能显著地促进成骨细胞的形成，由此可表明海南青牛胆植物总甾酮可改善因钙流失或成骨细胞合成受阻而造成的骨质疏松。

本发明的优点是为海南青牛胆提供了一种新的医药用途，即用来改善因钙流失或成骨细胞合成受阻而诱发的骨质疏松。本发明采用的制备方法优点是，除掉了大量的水溶性杂质和脂溶性杂质，从而提高活性，降低毒性，使活性成分更加集中，方法科学稳定，工艺简单，适合工业化生产。

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述。

实施例：

按本发明提取方法制备的总甾酮主要包含β-蜕皮甾酮(β-ecdysone)、罗汉松甾酮A(makisterone A)、24-表-罗汉松甾酮A(24-epi-makisterone A)和少量脂溶性杂质。在总甾酮中除去以上3种主要成分外，允许有脂溶性成分。上述总甾酮有效成分的含意是3种甾酮单体的混合物。海南青牛胆总甾酮的提取方法具体包括以下3个步骤：

1、海南青牛胆醇提取：药材用醇回流提取3次，3次的药材与醇的比例分别为1∶8，1∶6，和1∶4，3次时间分别为2，1.5和1小时，纱布过滤，合并3次滤液，减压回收至无醇味，得稠膏。

2、树脂富集：所得稠膏按1kg药材加0.2～1L水的比例稀释，离心，上清液加入到已处理好的大孔吸附树脂柱上，上样溶液体积量与湿大孔吸附树脂量之比为0.2～1L∶1kg。用10倍生药量的水洗脱至无色，继用10倍生药量的90％醇洗脱，合并醇洗脱液，减压回收醇至干，得总甾酮干膏。

3、吸附剂纯化：所得干膏用少量甲醇分次加热提取，合并甲醇液，加入2倍上柱干膏量的200～300目柱层析用Al₂O₃，使其充分吸附，拌半匀，挥尽甲醇。将拌有样的Al₂O₃加到处理好的Al₂O₃柱上，上柱干膏量与Al₂O₃量之比为1∶6。先用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脱剂洗脱，按3流份/保留体积接液(1保留体积以上柱氧化铝量∶洗脱剂＝1g∶1.2ml计)，共洗10个保留体积。再用同样量的氯仿∶甲醇＝4∶1梯度洗脱，回收洗脱剂得总甾酮，收率为0.17％。