[发明专利]一种葛根素的制备方法

说明书

技术领域：本发明属于一种从植物根部提取葛根素的方法。具体地，涉及一种从豆科葛属植物的根部提取葛根素(Puerarin)的方法。

技术背景：葛根素是一种异黄酮配糖体(C₂₀H₂₁O₉)，为中药葛根的主要有效成分之一。葛根素一般制备方法有：水提醇沉法，正丁醇一水萃取法、氧化铝脱色法，聚酰胺层析法，冰醋酸结晶法等。上述方法环节多，大量使用易燃、有毒的用机溶剂，易造成环境污染和对操作者健康的损害，生产成本高，周期长，且产品中杂质多，葛根素含量低等。

发明内容：针对现有技术存在的上述缺点，本发明旨在提供一种简单、低成本、无污染，无毒副作用、有效成分含量高的葛根素制备新方法。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

一种制备葛根素(Puerarin)的方法，将葛属(Pueraria spp.)植物的根部原料清杂干燥粉碎，然后经水提取、浓缩、干燥、水提取物—大孔吸附树脂柱层析分离、含水乙醇洗脱、浓缩、硅胶柱层析纯化、单一有机溶剂洗脱、浓缩、葛根素粗品或分步收集，浓缩得葛根素精品。

上述方法原料选取豆科葛属植物以及其他同属植物的根。

上述方法柱层析所使用的吸附剂为聚苯乙烯型大孔吸附树脂和硅胶。

上述方法大孔吸附树脂柱层析洗脱液为含水乙醇，硅胶柱层析洗脱液为单一有机溶剂如：氯仿、甲酸乙脂、乙酸乙脂等。

上述方法以聚苯乙烯型大孔吸附树脂为层析材料，水提取物与大孔吸附树脂的比例为1∶10，硅胶柱层析纯化条件为样品与200-300目的硅胶的比例为1∶15。

上述方法中葛根素的干燥方法除一般干燥方法外，可用冷冻干燥、喷雾干燥和微波干燥等。

本发明更具体的方法是将葛属植物根部原材料清杂、洗净、烘干、粉碎成粗粉，然后将葛属植物根部粗粉用水加热提取2次，每次提取时间为2小时，然后经过滤、浓缩、干燥得到水提取物；再经大孔吸附树脂柱层析，水提取物用10％的乙醇溶解后以大孔吸附树脂柱层析分离，并用10％的乙醇溶液洗脱至洗脱液无色无味，然后加大乙醇，结合TCL检测，收集波长为254nm显荧光部分的洗脱液，将所收集的洗脱液加水稀释，稀释液再经大孔吸附树脂柱层析，用乙醇洗脱，收集洗脱液并浓缩；最后经硅胶柱层析，用200-300目硅胶装柱，按样品与硅胶比例为1∶15上样，硅胶为用单一有机溶剂如：氯仿、甲酸乙脂或乙酸乙脂等洗脱，结合TCL检测，收集洗脱液，浓缩干燥即得到高纯度的葛根素。

与现有技术相比，本发明的方法具有下述的优点：

1、本发明从豆科葛属植物(如：野葛Pueraria lobata(Will.)Ohwi，粉葛(P.thomsonii Benth.)以及其他同属植物)的根部提取葛根素。并在方法中，用薄层层析(TCL)作为监测工艺流程各环节的手段。所得产品得率高，产品性能好，无毒副作用，有效成分含量高。

2、本发明方法中柱层析所用的材料分别为聚苯乙烯型大孔吸附树脂和硅胶，洗脱液分别为含水乙醇和单一有机溶剂(如：氯仿、甲酸乙脂、乙酸乙脂等)，其中大孔吸附树脂可以重复使用，乙醇和有机溶剂均可以回收利用，大大地降低了生产成本，减少了环境污染。

附图说明：

图1为本发明的工艺流程图；

图2为本发明葛根素标准品HPLC；

图3为本发明葛根水提取物HPLC，葛根素含量为29.40％；

图4为本发明水提取物经大孔吸附树脂分离后的HPLC，葛根素含量为47.06％；

图5为本发明硅胶柱层析纯化后的葛根素HPLC，葛根素含量为77.5％；

图6为本发明硅胶柱层析纯化、分步收集葛根素精品HPLC，葛根素含量为93.59％；

图7为本发明葛根素的结构示意图。

具体实施方式：

下面结合本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但本发明的内容并不局限于此。

实施例1：

(1)取野葛(P.lobata)的根部1公斤清杂、洗净、烘干、粉碎成粗粉；

(2)将葛根粗粉用水加热提取2次，每次提取时间为2小时，然后经过滤、浓缩、干燥得到葛根水提取物；