[发明专利]给基质提供具有现成的均匀分布的细胞外基质的方法无效
申请号: | 02141356.8 | 申请日: | 2002-06-04 |
公开(公告)号: | CN1400306A | 公开(公告)日: | 2003-03-05 |
发明(设计)人: | A·迈尔斯;S·R·伊尔斯利;F·J·马努扎 | 申请(专利权)人: | 贝克顿迪肯森公司 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;C12M3/00 |
代理公司: | 上海专利商标事务所 | 代理人: | 徐迅 |
地址: | 美国新*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基质 提供 具有 现成 均匀分布 细胞 方法 | ||
1.一种给基质提供现成的均匀分布的胞外基质的方法,其特征在于,包括步骤:
a)将胞外基质组分施涂在基质区域;
b)保温所述的胞外基质组分,使之聚合;
c)冷冻位于所述基质区域冷冻的该聚合的胞外基质;
d)冻干位于所述基质区域的、冷冻的胞外基质;
e)将冻干的胞外基质升温到室温。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述胞外基质组分被保温足够时间以便所述胞外基质形成凝胶。
3.如权利要求1所述的方法,其中所述胞外基质组分在升高的温度下保温。
4.如权利要求1所述的方法,其中所述胞外基质组分在37℃的温度保温
5.如权利要求1所述的方法,其中所述胞外基质组分在有二氧化碳存在下保温。
6.如权利要求5所述的方法,其中所述二氧化碳的浓度为5%。
7.如权利要求1所述的方法,其中所述聚合的胞外基质在冻干器中冷冻
8.如权利要求1所述的方法,其中所述聚合的胞外基质在温度低于-30℃的条件下冷冻。
9.如权利要求1所述的方法,其中所述胞外基质组分包含天然的胶原纤维。
10.如权利要求9所述的方法,其中所述胞外基质组分还包含的选自下组的组分:层粘连蛋白,巢蛋白,硫酸乙酰肝素蛋白多糖,生长因子,蛋白酶和它们的混合物。
11.如权利要求1所述的方法,其中所述基质是一种膜材料,它选自多孔膜,蚀刻膜,浇注膜及其组合。
12.如权利要求11所述的方法,其中所述的膜上的孔为约0.5-30ug/cm2插件膜表面。
13.如权利要求1所述的方法,其中基质包含选自下组的天然的或合成的聚合物:纤维素膜,多孔聚碳酸酯,多孔聚四氟乙烯,尼龙膜和网,玻璃滤网,聚对苯二甲酸乙二酯,聚甲基戊烷,聚丙烯,聚乙烯及其组合。
14.一种细胞培养装置,其特征在于,包含用于细胞生长的表面,所述的表面包被有胞外基质,所述的基质由下列步骤形成;
a)将胞外基质组分施涂在基质区域;
b)保温所述的胞外基质组分,使之聚合;
c)冷冻位于所述基质区域冷冻的该聚合的胞外基质;
d)冻干位于所述基质区域的、冷冻的胞外基质;
e)将冻干的胞外基质升温到室温。
15.如权利要求14所述的装置,该装置包含生长培养基。
16.如权利要求15所述的装置,所述的培养基是DMEM。
17.如权利要求14所述的装置,其中所述培养装置还包括选自下组的附加材料:细胞,抗体,酶,受体,生长因子,胞外基质的额外组分,细胞因子,激素,药物及其混合物。
18.一种细胞培养装置,其特征在于,包括适合细胞生长的表面;以及位于该表面上的胞外基质包被层,所述的基质包被层包含具有生物活性的蛋白溶液的聚合产物,其中所述基质中残留流体基本上通过冻干除去。
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