[其他]虫草菌种814选育及其发酵工艺

说明书

虫草菌８１４无毒，可做滋补品原料。菌丝含甘露醇５．７％，脂肪酸得率约１％，粗蛋白３９．０４％，总糖９．４４％，还原糖４．７５％，多糖４．６９％，氨基酸共１８种，总含量２３．４７％，游离氨基酸共２６种。培养基配方：萄葡糖３％，蛋白胨０．８％，ＫＨ₂ＰＯ₄０．１％，ＭｇＳＯ₄０．０５％，消泡油０．３％，培养条件：温度２６－２７℃，罐压０．４－０．６公斤／厘米²，通气量１∶０．４－１∶１∶１．２ｖ／ｖ／分，搅拌转速约２００转／分。

本发明属于虫草菌新菌种资源的开发利用，可做医药原料及滋补食品和饮料的原料。

本发明的目的在于用人工发酵进行工业化生产，以解决天然虫草资源之不足，部分或大部分满足市场的需要。

本虫草菌菌种814是本所于1981年从野外采集到的古尼虫草〔Cordyceps gynnii（Berk.）Berk.〕，经子囊孢子萌发而得，经该菌无性阶段鉴定，属于拟青霉中的一种（Paecilomyces guangdongensis Huang），本菌种保藏在武汉，中国典型培养物保藏中心，保藏号：CCTCC NO 85-00-3。

本菌种进行了蔡氏（Czapek）培养基培养，斜面固体培养和液体培养，菌种的形态特征因不同的培养条件而有所不同，本菌种814生长适宜条件是：（1）培养物质：葡萄糖3-5%;蛋白胨0.8-1%;KH₂PO₄0.1%;MgSO₄0.05%;（2）培养温度：26-27℃，（3）培养pH值：7.5。本菌种的菌丝化学成分：（1）甘露醇含量5.7%，（2）脂肪酸得率约1%（其中亚油酸50.95%，油酸24.3%，软脂酸10.1%）;（3）蛋白质、糖类的含量：总糖9.44%，还原糖4.75%，多糖4.69%，蛋白质39.04%;氨基酸共18种，总含量23.47%，游离氨基酸共26种。

本菌种814菌丝体毒性测定结果：（1）急性毒性试验：LD50＞30900毫克/公斤，按毒性分级标准，受试物属无毒级;（2）亚急性毒性试验：大白鼠给药前后，各组的红血球、白血球、血清谷丙转氨酶以及血浆非蛋白氮均无明显差异，心、肝、肾、脾等组织切片检查亦未有异常;（3）蓄积毒性试验：用蓄积系数法试验结果，蓄积系数K＞5.3，说明无明显蓄积作用;（4）Ames试验：用TA98、TA100标准菌株，用渗入法试验，本试验未发现有致突变作用，结果为阴性;（5）微核试验：未发现对小鼠骨髓细胞有致突变作用，结果为阴性;（6）小鼠睾丸生殖细胞染色体畸变分析，未发现有致突变效应，结果为阴性;（7）砷、铅、铜及黄曲霉素含量测定，四项均符合卫生要求。

本发明的人工发酵产品，与天然野生虫草产品比较起来，具有成本低、可以工厂化生产、能有效地解决天然虫草来源不足的优点。

实施例1

本菌种814在察氏（Czapek）培养基上培养时的形态特征是：菌落初期白色，后由于产生分生孢子，略呈粉白色，最后为灰白或银灰色，圆形。24℃培养7天直径8-12（-14）毫米，培养14天直径16-20（-24）毫米，反面中部近棕色，具环纹，边缘白色，色泽稍扩散;菌丝壁薄，光滑。分生孢子梗透明，光滑，从菌丝长出，分枝或不分枝;小梗瓶状，单生、对生或轮生，基部膨大，宽2-3微米，最窄处约0.7微米，长7.5-17.5（-25）微米，分生孢子单孢，宽椭圆形，径2.7-4.2×2.2-2.7微米，串生，长达150微米以上，具小疣。

实施例2

本菌种814在斜面固体培养时的形态特征是：菌溶初白色，后产生大量分生孢子渐转呈粉白色，老后变灰色，具放射状沟纹，中央凸起，紧贴培养基部分灰棕色，有时出现绿色，在埋伏型菌丝体上常出现一种变形菌丝和大孢子，大孢子生于长圆形或卵形小梗上，单生至多个簇生，亦有侧生于菌丝体上的，分生孢子在27℃条件下培养7天的种龄，经过9小时培养开始萌发，至11小时后大量萌发，先后长出1至数个芽管，随后芽管伸长分枝形成菌丝体。

实施例3