[其他]裂褶菌的培养工艺及其利用

说明书

本发明属于担子菌类的培育及利用技术领域。本发明的目的是提高裂褶菌菌丝体及裂褶多糖的得率。本发明的技术特征是将从腐木上经组织分离的裂褶菌南大８４３菌株经纯化后，用天然黄豆粉、葡萄糖或庶糖、酵母膏、硫酸镁、磷酸二氢钾、盐酸硫胺素作培养介质，进行发酵培养，得到含菌丝体及多糖较高的裂褶菌发酵液，并从发酵液中提取抗肿瘤、抗放升白、抗菌素增效剂、抗炎的裂褶多糖及用作调味品和食品强化剂的氨基酸。

本发明属于担子菌类的培育及利用技术领域。

本发明所述担子菌类中的一种裂褶菌拉丁文学名Schizophyllum Commune Fr。南大843菌株1985年5月16日保藏于北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC NO.0012。

在已有技术中，中国科学院微生物研究所用做纯种保藏的裂褶菌菌株，其母种培养介质是马铃薯、葡萄糖、琼脂或麦芽汁琼脂，最适温度24°-26℃，尚未应用于工业生产。国外日本“The Japanese Journal Antiobics”Vol.23（2）：157-160页中报导。裂褶菌培养采用合成培养介质，即用化学成份已知的有机物或无机物配制培养介质，其成本高，菌丝体得率低（培养5天1升发酵液含1-5g菌丝体），多糖得率亦低。（培养5天1升发酵液含0.2-1g多糖）。

本发明的目的是用黄豆粉等做培养介质培养裂褶菌，提高菌丝体及裂褶多糖的得率，并从裂褶菌中提取抗肿瘤、抗放升白及调整机体免疫功能、生产抗菌素增效剂的裂褶多糖和人体必需的氨基酸。

本发明的技术方案是裂褶菌从腐木上经组织分离获得纯菌株南大843，将其接种在PDA或麦芽汁固体斜面培养基上，温度24℃，生长7-10天，然后转管纯化，放入0°-2℃的冰箱中保存备用。液体发酵培养用天然黄豆粉等配制培养介质，其成份和配比是，1000ml培养介质含天然黄豆粉5-10g，葡萄糖或庶糖30-40g，酵母膏2g，硫酸镁0.5g，磷酸二氢钾1g。培养介质还可用盐酸硫胺素做添加剂，每1000ml培养介质可增加0.01-10mg。250ml摇瓶装75-150ml培养介质，500ml摇瓶装150-250ml培养介质，采用往复式摇床，振荡速度80-130次/分，或旋转式摇床，振荡速度100-200转/分，培养温度24℃-26℃。在菌丝大量生长时，菌液由深变浅，由混浊逐渐变清。随着培养时间的延长，发酵液中还原糖、氨态氮、pH都逐渐降低，菌丝体重量不断增加，至第6天多糖含量最高，还原糖降到1%以下，氨态氮降到15%，pH下降到4.6-4.8，菌球的体积占发酵液总体积70%，此时可终止发酵，发酵周期为五天。

固体发酵培养用70-78%（重量）的甘庶渣（或木屑、山芋渣、棉子壳）、1%（重量）的庶糖或葡萄糖、20-28%（重量）的麸皮或米糠、1%（重量）的石膏或碳酸钙，加水拌匀、pH自然，装入菇瓶，在1.5kg/m²的压力下消毒1-2小时，冷却后，在无菌操作下试管斜面母种接种于菇瓶内，一管母种接种1-3瓶，培养温度22-26℃，20-30天菌丝体布满全瓶即可采收。

裂褶菌在液体发酵培养工艺下生长，每升发酵菌液中含3-5g裂褶多糖（Schizophyllan）（干重），含200-300g菌丝体（湿重）;每100g菌丝体（湿重）含0.8-1g多糖，发酵液和菌丝体中氨基酸含量如下：

氨基酸名称 100ml发酵液中 100g菌丝体中氨

氨基酸含量 基酸含量（g）

（mg/ml） 2.33

天门冬氨酸 8.99 1.22

苏氨酸 3.94 1.29

丝氨酸 2.62 3.82

谷氨酸 11.0 1.13

甘氨酸 2.72 1.65