[其他]一种用牛、马血清制备放免及生化质控物的方法

说明书

本发明为一种采用牛、马血清制备放射免疫和生化测定质控物的方法。本方法以牛血清或马血清为原料，用亲和层析法或离子交换层析法，特异性除去血清中所含的某种待测物或／和干扰测定的激素、生物活性物质、酶、电解质后，作为配制该待测物的生化或放免测定质控物的基质，在其中加入一定量的已知待测物，从而配制成为用放免或生化方法检测该待测物的质量控制品。本发明的优点是：原料来源丰富，成本低廉。使用安全。制备方法先进，产品质量稳定可靠。

本发明属于生物制品（诊断试剂）的制备方法。所得产品可以作为放射免疫（RIA）和生物化学检测的质控物，是用于监控放免和生化测定准确性所必备的试剂。

目前世界上普遍采用的质控物制备方法，是选择乙肝病毒表面抗原阴性（HBsAg（一））的正常人或病人血清，经简单处理后，进行调配制得。

例如：

中华人民共和国卫生部药品和生物制品检定所（1981）曾用正常人混合血清加10%糖用活性碳搅拌6～8小时，4℃吸附24小时，4000rpm低温离心，取上清液经2kg/cm²氮气加压过滤除菌，得到低T₃、T₄纯品，分装，冻干，制成T₃、T₄放免质控物。

上海市计划生育研究所（1983）制备生殖激素放免质控物，是收集含某种激素较高或较低的人血清，互相调配制成。

近年出现在“剔除”某物质的血清中，加入被测标准物的方法。如英国爱丁堡实验室（1982）采用在人血清中加入少量标记LH和FSH，与过量偶联有豚抗LH和豚抗FSHIgG的琼脂凝胶处理，混合后，过夜。滤取血清，加入过量偶联有羊抗豚IgG琼脂凝胶处理，以去除血清中含有的少量豚抗LH和FSHIgG。此法仍不能完全除去LH和FSH，其血清中含标记的LH和FSH仍有原量的10%。

生物化学检验质控物，近年有报导用动物血清取代人血清作原料者，但是均未采用亲和层析法和离子交换层析法处理血清。

上述方法由于大多采用人血清作原料，大量采集不易，血清均质性差，乙型肝炎表面抗原阳性率高，大批量生产和长期保存困难，成本较高。而且，上述处理方法也不可能特异去除某种待测物或干扰物，因而得不到真正不含某种待测组分的“零”血清，故质控物的质量不高、稳定性差;且处理方法的工艺繁复，所用材料多只能一次性使用。

本发明的目的是：在提高质量，降低成本，保证使用安全的前题下，寻求一种质控物基质材料生产的新材料、新方法。

本发明的要点是：以马血清或牛血清为原料，过滤除菌后，经各种特定的亲和层析或离子交换层析处理，制成不含某种待测物或干扰物的“零”血清，再加入一定量的某种激素、生物活性物质、酶或电解质纯品，配制成包括零、低、中、高浓度该物质的放射免疫或生化质控物。

本发明的优点是：原料来源丰富，成本低，使用安全。制备方法先进，产品质量稳定可靠。

图1是放免及生化质控物生产流程图;图2是去激素或生物活性物质的亲和层析柱制备工艺流程;图3是去酶亲和层析柱的制备。

实施例：

一、制取去激素和去生物活性物质血清的工艺流程如下（以去生长激素（hGH）血清的制备为例，参见工艺流程图Ⅰ、Ⅱ）。

1.抗hGHIgG的提纯：将抗hGH血清10ml用等体积Tris/HCl（0.2M.pH8.6含2M/LNaCl缓冲液稀释，加于supA-琼脂糖凝胶（supA-Sepharose4B）层析柱（1×10cm）分离纯化。用0.1M的相同缓冲液淋洗至无蛋白流出后，用0.05MHAc/HCl（pH3.0）缓冲液洗脱，收集洗脱液的蛋白峰，立即加入等体积的0.1MH₃PO₄（pH9.0）中和至pH8.6，此即为有活性的特异性IgG（回收率可达80%）。

2.抗hGHIgG-琼脂糖凝胶亲和层析柱的制备：