[发明专利]脑利尿钠肽的同种型

说明书

相关申请的交叉参考

本申请要求2003年6月20日提交的美国临时专利申请号60/480,460的优先权。

技术领域

本发明涉及诊断心脏疾病(例如心力衰竭)，更具体地，通过测定脑利尿钠肽(BNP)的同种型来诊断心脏疾病的方法和材料。本发明也涉及治疗心脏疾病(例如，心力衰竭)和肾脏疾病(例如，肾衰竭)的方法和材料。

背景技术

利尿钠肽家族的许多成员是调节体液稳态的激素。心房心肌细胞对血管内容积增加的反应是分泌心房钠尿肽(ANP)。一旦ANP进入循环系统中，其主要作用于肾脏、血管组织和肾上腺，作用是导致肾脏排出钠和水，而降低血管内容积和血压。BNP也来源于心肌细胞，类似于ANP，在人血浆中循环。BNP能促使尿钠排出、抑制肾素、舒张和松弛血管。BNP主要的循环和储存形式是具有环结构的32个氨基酸的肽。BNP的生理作用由连有鸟苷酸环化酶的受体-利尿钠肽受体A(NRP-A)介导。将BNP从循环系统中除去的NRP-C受体促使BNP清除。BNP也通过中性内肽酶的酶切作用被降解。C-型利尿钠肽(CNP)来源于内皮细胞，作用是血管舒张和生长抑制肽。曼巴利尿钠肽(DNP)分离自白唇曼巴蛇(Dendoaspis angusticeps)或绿色曼巴蛇(green mamba snake)的毒液，其结构类似于ANP、BNP和CNP。

在人充血性心力衰竭期间，血浆和心脏中的ANP和BNP增加，并且除了作为心室机能障碍的血浆标志之外还发挥了心肾保护作用。流行病学证据表明至少3％的45岁以上成年人患有心室收缩机能障碍，52％的患者可能无症状。

发明概述

本发明以鉴定到的另路剪接产生的新形式BNP为基础。另路剪接的人BNP同种型含有BNP的17个氨基酸的二硫环结构，具有独特的羧基末端并得自不同的剪接变异。其中一种同种型，BNP2具有和环相连的独特的33个氨基酸残基的C-末端突出端。该同种型是引入内含子2所致。BNP3含有新发现的14个氨基酸残基的C-末端突出端并且是内含子2中存在的另路剪接纳体所致。如文中所述，心力衰竭期间，心肌细胞中的BNP2和BNP3的表达增加。所以，BNP2和BNP3多肽或编码BNP2或BNP3的核糖核酸可用作心脏疾病的标志。如此，这种多肽或核糖核酸的存在、缺乏或水平可用于诊断心脏疾病并监测心脏疾病的治疗效果。此外，BNP2和BNP3可用作治疗心脏疾病的疗剂。

本发明的特征在于一种纯化多肽和对该多肽具有特异性结合亲和力的抗体。该多肽含有选自SEQ ID NO：1、2、3、4、35或36所示氨基酸序列；具有SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的至少6个毗连残基的序列；与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示氨基酸序列具有至少65％序列相同性的序列；和与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示片段的至少长6个毗连残基具有至少65％序列相同性的序列。该氨基酸序列与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示氨基酸序列可具有至少75％(例如，80、90或95％)的序列相同性或与SEQID NO：1或SEQ ID NO：2所示片段的至少长6个毗连残基具有至少75％(例如，80、90或95％)的序列相同性。在一些实施方案中，该多肽可含有SEQ ID NO：35或SEQ ID NO：36所示氨基酸序列。药物组合物可含有一种多肽和药学上可接受的运载体。

在另一方面，本发明的特征在于编码上述纯化多肽的分离的核酸、包括该核酸的载体和包括该载体的宿主细胞。所述多肽可由以下核酸序列编码：SEQID NO：5所示核酸序列；SEQ ID NO：5所示核苷酸383到489的核酸序列；SEQID NO：6所示核酸序列或SEQ ID NO：6所示核苷酸388到432的核酸序列。宿主细胞可是真核宿主细胞。